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BOSTER 博士德生物 Product Information 地址:武汉市关山二路特一号国际企业中心

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电话:800-880-8748,(027)67845390/1/2/3/5 传真:(027)67845396

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网址:www.boster.com.cn BOSTER 在/平/凡/中/创/造/奇/迹BOSTER EDTA 脱钙液 产品编号:AR1071 规格:500ml 保存条件: 4℃保存 , 一年有效,避免阳光直射. 产品简介: 在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬.由于组织中的钙 和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片.骨组织含钙量最多.除了骨组织之 外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程.脱钙是制作骨组织切 片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织. 乙二胺四乙酸(EDTA)与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同 时又促进晶体内层的结合钙向外转移.借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH 中性时可起螯合作用.其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酸酶)和细胞 抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析. 主要用途: 用于骨组织、牙齿等脱钙. 使用说明: 1. 将骨组织截成 0.5 cm* 0.3 cm* 0.2 cm 大小骨片,生理盐水清洗后立即投入冷冻的固定液 中,4 ℃固定

12 h~24 h;

固定结束后骨片在 0.2 mol 磷酸缓冲液中充分漂洗. 2. 漂洗后投入脱钙液中,室温下脱钙,每日检查脱钙情况,直至骨片脱钙完全为止.脱钙 结束后,骨片用蒸馏水冲洗

20 min,脱钙液每隔 4-5 天更换一次新液,经过

3 次更换新液 后,此后每天更换新液,但请根据具体实验具体分析.以大头针能刺进骨密质为完成脱 钙标准. 3. 然后进入常规脱水处理程序并包埋、切片. BOSTER 博士德生物 Product Information 地址:武汉市关山二路特一号国际企业中心

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网址:www.boster.com.cn BOSTER 在/平/凡/中/创/造/奇/迹BOSTER 注意事项: 1. 为使脱钙更为充分,每次最好更换新液,这既弃去了脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又起 到降低脱钙温度的作用. 2. 脱钙时间以脱钙完成为标准:以大头针能轻易刺进骨密质为准. 3. 脱钙温度不要太高,一般以室温(25 度)为宜,高温可加快脱钙速度,但可破坏组织中 的核酸而影响染色效果.低温(4 度)则会减慢脱钙速度,使组织在脱钙液中浸泡过久而引 起损伤. 4. 为了提高 EDTA 的脱钙速度,骨组织取材尽量取薄. 5. 为了提高 EDTA 的脱钙速度,也可以采用微波脱钙.用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱 钙时间,以微波间歇脱钙,每次辐射

1 分钟,每次辐射之间都将烧杯移至室温,冷却

5 分钟, 以保证每次的微波辐射脱钙液的温度不至于太高(70℃).脱钙时脱钙液温度过高,易导致 假阴性,背景色深等缺点.因此,在时间要求不紧迫的前提下,该方法也不应是首选. 6. 为达到骨组织既充分脱钙, 又保护骨组织的抗原不受破坏, 需要对含钙的组织充分固定之 后再进行脱钙.然后再行常规制片.