编辑: 赵志强 | 2013-04-06 |
【预期用途】 主要用于区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的涂片染色. 【检验原理】 革兰氏染色法(Gram stain)是由丹麦医师革兰(Gram)氏于
1884 年所创立,当时发现革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚, 肽聚糖网层次较多且交联致密,经革兰氏染色后能将结晶紫与碘的复合物牢固留在壁内,不容易被脱色液脱掉而仍呈紫色, 在此基础上形成了革兰氏染色液试剂. 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法(属复染法) ,可用于标本涂片或菌落涂片,染色后细菌与环境形 成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,从而用以临床分类鉴定.染色结果将细菌分为革兰氏阳 性菌(紫色)和革兰氏阴性菌(红色)两大类. BaSO 快速革兰氏染色液试剂可以缩短染色时间,通常整个染色过程只需
1 分钟,而且几乎没有伪阴性情况发生,是目 前临床检验微生物实验室的较佳选择. 【主要组成成份】 试剂组成 主要成份
1、龙胆紫液(Crystal Violet) 龙胆紫、乙醇
2、碘溶液(Iodine Solution) 碘、碘化钾
3、脱色液(Decolorizer) 丙酮、乙醇
4、沙黄溶液(Safranin Solution) 沙黄、乙醇 【储存条件及有效期】 有效期:原包装未开封染色液的有效期为
24 个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后
6 个月内使用完,每次用后 应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质. 储存条件:本试剂应贮存在相对湿度不大于 80%,无腐蚀性气体和通风良好的 5℃~30℃室温环境. 【样本要求】 涂片时必须注意细心操作,涂片薄而均匀.制备的涂片应自然干燥,采用加热固定时,固定温度不宜过高,以玻片背 面接触手背不烫为准,否则可能使细菌形态改变影响观察结果. 【检验方法】
1、加龙胆紫液(Crystal Violet) 染色
10 秒,之后水洗,甩干.
2、加碘溶液(Iodine Solution)染色
10 秒,之后水洗,甩干.
3、加脱色液(Decolorizer) 脱色(10~20)秒,之后水洗,甩干.
4、最后加沙黄溶液(Safranin Solution) 复染
10 秒,之后水洗.
5、以滤纸吸干或在空气中干后,镜检. 【检验结果的解释】 革兰氏阳性菌(Gram-Positive)呈紫色;
革兰氏阴性菌(Gram-Negative)呈红色. 【检验方法的局限性】 采用陈旧标本涂片时有产生伪阴性的可能. 【产品性能指标】 龙胆紫液的 pH 值为 5.5±2.0. 【注意事项】
1、染色时间须视何种标本、涂片厚薄等稍作调整;
染妇科白带涂片时应稍延长染色时间(不少于
10 秒),可获得更好的 染色效果.
2、试剂用完后,请迅速盖好,以免挥发.
3、脱色液用完后,可用丙酮作为代用脱色液,脱色时间可稍短.
4、试剂贮存时,尽量避免高、低温环境及阳光直射.
5、冬季室温过低时,染色时间要适当延长.
6、本试剂应由专业人员使用.
7、使用前应详细阅读使用说明书,在有效期内使用,并做好个人卫生防护.
8、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物.
9、生产批号、有效期见外包装. 【标签所用图形、符号、缩写等内容的解释】
1、LOT:产品的生产批号