PDF《产品说明书》

iClick? EdU Andy Fluor

488 Flow Cytometry Assay Kit ――EdU 法细胞增殖流式检测试剂盒 产品货号 包装规格 A007

250 次 储存条件:-20℃,避光保存.

激发/发射波长:Andy Fluor

488 azide: 495/520 nm. 产品说明书 GeneCopoeia, Inc. 广州易锦生物技术有限公司 广州高新技术产业开发区广州科学城 掬泉路

3 号广州国际企业孵化器 F 区8楼邮编:510663

电话:4006-020-200

邮箱:[email protected]

网址:www.genecopoeia.com(英文) www.igenebio.com(中文) ?

2017 GeneCopoeia, Inc. iClick? EdU Andy Fluor

488 Flow Cytometry Assay Kit 使用说明书

2 iClick? EdU Andy Fluor

488 Flow Cytometry Assay Kit 产品货号: A007 试剂盒组份: 组份 试剂名称 体积/质量 浓度 储存温度 组份 A EdU 2*1 ml

10 mM in DMSO -20℃ 组份 B Andy Fluor

488 azide

150 ?l NA -20℃,避光保存 组份 C iClick fixative

25 ml 1*solution 2~8℃ 组份 D iClick permeabilization and wash reagent

50 ml 10*solution 2~8℃ 组份 E CuSO4

1 ml

100 mM in H2O -20℃ 组份 F iClick EdU buffer additive

200 mg NA -20℃ 注:按照推荐的储存条件保存有效期为

1 年,请注意避免反复冻融,请将至于-20℃储存的组份提前分装. 产品介绍 直接测定 DNA 合成是细胞增殖检测的最准确方法之一,是测定物质毒性、评估药 物安全评价、细胞健康的基本方法,其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类 似物-BrdU 进行检测. 因为在细胞周期的 S 期, 和细胞一起孵育的 BrdU 能掺入 DNA 分子中,再结合 BrdU 抗体与掺入 DNA 的BrdU 特异性结合,就能够检测到 DNA 复制活跃的细胞.但BrdU 有一大缺点,就是需要变性 DNA 后才能与抗体结合,但 这就破坏了 DNA 双链结构,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性 降低等问题. iClick? EdU Andy Fluor

488 细胞增殖流式检测试剂盒采用 EdU 对细胞做标记用于 细胞增殖检测.EdU(5-Ethynyl-2'- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷酸类似物, 在细胞增殖时 EdU 能够掺入正在复制的 DNA 分子中,检测是基于一种点击化学 (Click Chemistry)反应:铜催化的叠氮和炔的共轭结合.利用 EdU 与染料之间的 点击化学反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于 S 期的 细胞百分数. 与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确.EdU 只有BrdU 抗体大小的 1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、 热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观 测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度. 注意事项 ? 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭. ? 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作. iClick? EdU Andy Fluor

488 Flow Cytometry Assay Kit 使用说明书

3 实验所需耗材(不包含在试剂盒中) ? 缓冲液,比如 PBS,D-PBS 或TBS ? 含1% BSA 的PBS(pH 7.4) ? 去离子水 ? 1.5 ml EP 管或其他流式分析管 EdU 法细胞增殖流式检测实验流程 实验步骤 1. EdU 标记 注意:EdU 标记的最佳浓度根据细胞类型而变化.建议使用 EdU 的起始浓度为

10 μM.细胞 培养基,细胞浓度,细胞类型及其它因素都可能影响标记 EdU 标记效率.所以,在进行初始实 验时,要先根据自身的细胞类型和实验条件,选用几组不同的 EdU 浓度来确定最佳的 EdU 浓度. 1.1 每孔 1*105 ~3*106 细胞接种于