编辑: 赵志强 | 2013-05-11 |
1 柱内径及推荐流速
3 (乙腈体系洗脱液条件) 1.9 ? m PT/PTP
100 MPa 2.0 mmI.D. : 0.2~0.8 mL/min 3.0 mmI.D. : 0.4~1.6 mL/min
5 ? m,
3 ? m PTH/PTP
45 MPa
2 2.1 mmI.D. : 0.2 mL/min 3.0 mmI.D. : 0.4 mL/min 4.6 mmI.D. : 1.0 mL/min WT 柱长50~150 mm :
20 MPa 柱长250 mm :
25 MPa 内径≥10 mm :
10 MPa 2.0 mmI.D. : 0.2 mL/min 3.0 mmI.D. : 0.4 mL/min 4.6 mmI.D. : 1.0 mL/min
1 请注意在压力上限附近连续使用或者剧烈的压力变动都有可能引起色谱柱寿命缩短.
2 PTH/PTP 型的常规使用压力建议在30 MPa 以下.在压力上限附近连续使用有可能会造成色谱柱寿命缩短.
3 由于柱压随柱长、柱温、流动相的组成等不同而存在差异,因此使用时请根据实际情况适当调节流速. ? 虽然色谱柱从水相体系溶剂到非水相体系溶剂都可以使用,但在极性极端不同的溶剂间进行反复置换,可能会造成色谱柱性能的 降低.通常可使用的有机溶剂为乙腈、甲醇、四氢呋喃(THF)等.另外,在使用 THF 时,请注意 PEEK 配管等的耐溶剂性. YMC 上海代表处:上海市长宁区仙霞路
319 号 远东国际广场 A 栋2404 C
2405 TeL:
021 C
62351388 URL:www.ymcchina.com (UM180703AC) 3/3 如果产品出现破损或与所订购产品不符时,请在立即联系经销商. 株式会社 YMC YMC USER'S MANUAL ? 本色谱柱的使用pH 范围及使用温度范围,请参照②产品规格一览.同时请注意以下几点: 色谱柱的寿命除与使用pH 有关外, 还因温度和洗脱液组成等条件而存在很大差异. 一般而言, 柱温、 缓冲液及添加剂 的浓度越高,有机溶剂的浓度越低,越有可能会造成色谱柱寿命缩短. 如需长期使用碱性条件,建议使用1~ 10mM 等低浓度的有机缓冲液(三乙胺、甘氨酸等) ,并在低温(小于30℃) 的条件下进行分析.同时,推荐有机溶剂为甲醇. ? 如需置换洗脱液时,请注意有机溶剂间的互溶性和盐的析出现象.另外,为了避免样品和溶解样品的溶剂中所含盐类在色谱柱内 析出,请先确认与流动相的互溶性后再进样. ? 样品溶解溶剂请尽量使用与初始洗脱液同一组成的溶液.如使用溶解能力比洗脱液更高的溶液,可能会导致峰形变宽、分离度和 再现性下降. ? 为了预防因筛板堵塞而引起的柱压上升,请预先使用0.2? m 以下的滤膜对洗脱液及样品溶液过滤. ? 由于Triart C18 ExRS 为强疏水性填料,当置换为有机溶剂配比偏低的洗脱液时,有可能会出现不易平衡的情况.关于有机溶剂 配比,建议使用15%以上的甲醇,如需选用极性较甲醇低的有机溶剂时,其最低配比也应在10%以上.另外,当从甲醇/水体系 置换为乙腈/水体系时,如乙腈的组成比低于20%,有可能会发生保留时间与峰形异常.此时,可先用60%乙腈/水置换,之后再 置换为低配比乙腈的洗脱液. ⑥ 色谱柱的清洗(一般方法) ? 当流动相中不含缓冲液或盐类物质时,可直接提高流动相中的有机溶剂的浓度来清洗柱内残留的强保留物质.可使用的有机溶剂 至100%.特别是脂溶性较高的成分被吸附在柱内的情况,添加 THF 有时可以取得较好的清洗效果. ? 对于洗脱液中含有缓冲液或盐的情况, 先用不含此类物质的水/有机溶剂混合液 (与洗脱液同等配比) 置换后,再按与上述同 样的方式进行清洗. ? 在pH 值临界点附近使用后,如只用水清洗,可能会引起色谱柱的劣化.请使用前面所提到的水/有机溶剂混合液进行通液清洗. ? 由于蛋白质或多糖类等高分子化合物附着在柱内,一般很难清洗去除.如使用含有此类物质或杂质较多的样品进行分离时,推荐 使用固相萃取(SPE)等对样品进行前处理或使用保护柱.