PDF《OLYMPUS》

OLYMPUS OLYMPUS 奥林巴斯生物显微镜 奥林巴斯生物显微镜 技术交流 技术交流 荧荧光光显显微微镜镜生物秀-专 心做生物www.

bbioo.com 荧光显微镜的优点和用途 荧光显微镜的优点和用途 优点: 优点: ? ? 检出能力高 检出能力高 ? ? 对细胞的刺激小 对细胞的刺激小 ? ? 能进行多重染色 能进行多重染色 用途: 用途: ? ? 物体构造的观察 物体构造的观察 ? ? 荧光的有无、色调比较进行物质判别 荧光的有无、色调比较进行物质判别 ? ? 发荧光量的测定对物质定性、定量分析 发荧光量的测定对物质定性、定量分析 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 什么是荧光 什么是荧光 ? ? 物质中的电子吸收光的能量由低能状态转 物质中的电子吸收光的能量由低能状态转 变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光. 变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光. 即:物质吸收短波光,发射出的长波光. 即:物质吸收短波光,发射出的长波光. 一种光化荧光 一种光化荧光 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 荧光的种类 荧光的种类 自发荧光 自发荧光 二次荧光 二次荧光 自发荧光:物质受光激发产生的固有荧光 自发荧光:物质受光激发产生的固有荧光 二次荧光:物质借荧光色素受光激发产生的荧光 二次荧光:物质借荧光色素受光激发产生的荧光 染染色色不染色 不染色 激发光 激发光 发射光 发射光 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 荧光的性质 荧光的性质 ? ? 吸收光 吸收光 ? ? 保持固有的荧光特性 保持固有的荧光特性 ? ? 荧光波长>激发波长( 荧光波长>激发波长(STOKES STOKES 法则) 法则) ? ? 荧光强度极小于激发光的强度 荧光强度极小于激发光的强度 ? ? 有不同程度的衰减 有不同程度的衰减 ? ? 荧光强度取决于激发光强度、被检物浓 荧光强度取决于激发光强度、被检物浓 度、荧光效率 度、荧光效率 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 荧光显微镜的种类 荧光显微镜的种类 透射式 透射式 落射式 落射式 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 荧光显微镜的主要部件 荧光显微镜的主要部件 透射式 透射式 ? ? 汞灯光源 汞灯光源 ? ? 激发滤色镜 激发滤色镜 ? ? 暗场聚光镜 暗场聚光镜 ? ? 吸收滤色镜 吸收滤色镜 落射式 落射式 ? ? 汞灯光源 汞灯光源 ? ? 激发滤色镜 激发滤色镜 ? ? 分色镜 分色镜 ? ? 吸收滤色镜 吸收滤色镜 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 透射荧光显微镜的构造 透射荧光显微镜的构造 吸收滤色镜 吸收滤色镜 暗场聚光镜 暗场聚光镜 激发滤色镜 激发滤色镜 汞灯箱 汞灯箱 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 落射荧光显微镜的构造 落射荧光显微镜的构造 吸收滤色镜 吸收滤色镜 激发滤色镜 激发滤色镜 分色镜 分色镜 汞灯 汞灯 紫外线保护罩 紫外线保护罩 孔径光栏 孔径光栏( (FS FS) ) 视场光栏 视场光栏( (AS AS) ) 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 落射荧光显微镜各部件特性和作用 落射荧光显微镜各部件特性和作用 ? 汞灯光源 汞灯光源: : 提供激发光 提供激发光( (U U、 、V V、 、B B、 、G) G) ? 激发滤色镜 激发滤色镜: : 波长选择 波长选择 nm T% BAND PASS BAND PASS 生物秀-专 心做生物www.bbioo.com 落射荧光显微镜各部件特性和作用 落射荧光显微镜各部件特性和作用 ? 吸收滤色镜 吸收滤色镜: : 透过荧光 透过荧光, ,阻挡杂光 阻挡杂光 ? 分色镜 分色镜: : 反射激发光 反射激发光, ,透过荧光 透过荧光 > >A A 透过 透过 A