PDF《使用说明书》

订购热线:4008898798 021-61725725 QQ:2881505690

2881505696 监督

电话:13818158258 人血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)试剂盒(ELISA) 使用说明书 ? 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人 血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)的含量.

? 有效期:6个月 ? 保存条件:2-8℃ ? 本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断 实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA) .往预先包被人血小板衍生生 长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标 记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤.用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝 色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的人血小板衍生生长因子可溶 性受体α(PDGFsR-α)呈正相关.用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,计算样品 浓度. 样本处理及要求 1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000*g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融. 2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃

1000 *g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融. 3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果) ,称重后将组织剪碎.将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体 订购热线:4008898798 021-61725725 QQ:2881505690

2881505696 监督

电话:13818158258 积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录. 推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨.为了进一步裂解组 织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融.最后将匀浆液于5000*g离心5~10分钟, 取上清检测. 4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000*g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置 于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融. 注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测. 需要而未提供的试剂和器材 1. 酶标仪(450nm) 2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒温箱 4. 蒸馏水或去离子水 试剂盒组成 名称

96 孔配置

48 孔配置 备注 微孔酶标板

12 孔*

8 条12 孔*

4 条无标准品 0.3mL*6 管0.3mL*6 管无样本稀释液 6mL 3mL 无 检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20* 洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释 底物 A 6mL 3mL 无 底物 B 6mL 3mL 无 终止液 6mL 3mL 无 封板膜

2 张2张无说明书

1 份1份无自封袋

1 个1个无备注: 1. 标准品浓度依次为:

20、

10、

5、2.

5、1.

25、0.625 ng/ml 2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中 直接取50μL样本上样即可.当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本 进行适当稀释后再进行实验. 注意事项 1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果.所有试剂都必须在使用前达到室 订购热线:4008898798 021-61725725 QQ:2881505690

2881505696 监督

电话:13818158258 温20-25℃.使用后立即冷藏保存试剂. 2. 洗板不正确可以导致不准确的结果.在加入底物前确保尽量吸干孔内液体.温育过程中 不要让微孔干燥掉. 3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值. 4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用. 5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果. 6. 在储存和温育时避免强光直接照射. 7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上. 8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体.任何漂白成分都会破坏 试剂盒中反应试剂的生物活性. 9. 不能使用过期产品. 10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置. 试剂准备 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用. 20* 洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20* 洗涤缓冲液加19份蒸馏水. 操作步骤 1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃. 2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;