PDF《产品说明书》

LysoView Green ――溶酶体绿色荧光探针 产品货号 包装规格 C048

1 ml,1 mg/ml 储存条件:-20℃,避光保存.

激发/发射波长:443/505 nm pKa:5.2 产品说明书 安迪福诺生物科技(武汉)有限公司 Wuhan ABP-Biosciences Co.,Ltd 武汉市东湖新技术开发区高新二路

388 号 武汉光谷国际生物医药企业加速器

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2017 ABP Biosciences, Inc. LysoView Green 使用说明书 产品介绍 LysoView Green 是一种溶酶体绿色荧光探针,是荧光素 pH 指示探针,可以用来区分 酸性细胞器,实现对溶酶体的特异性标记,从而将动态研究活细胞内溶酶体生物合成 和功能成为可能.LysoView 在酸性细胞器内富集,可导致其质子化,而质子化可以减 轻染料分子侧链上的弱碱性,以减少荧光淬灭,使产生的荧光信号强度增大.因此, LysoView 表现出 pH 依赖性,在酸性条件下,荧光信号强度增加. LysoView Green 可以单独或组合使用,检测酸化的溶酶体和细胞内溶酶体的功能改 变.例如,某些肿瘤细胞的溶酶体具有较低的 pH 值,而有些肿瘤细胞则相反.此外, 一些细胞的细胞器酸化缺陷表现为囊性纤维化合其他病症.LysoView Blue 荧光探针 在此类应用上具有非常广泛的意义. 注意事项 ? 荧光染料不可避免的存在淬灭问题,请存放操作时注意避光,以减缓荧光的淬灭. ? 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作. 操作指南 细胞制备与染色 注意:①打开产品包装前,请先将产品预热至室温,将装有产品的小管短暂离心,使融有染料 的DMSO 溶液沉积于管底. ②LysoView Green 的最佳工作浓度取决于不同的实验需求,本实验操作步骤说明仅提 供一些初始条件作为参考.具体的染色浓度需要根据细胞类型、产品对细胞和组织的通 透性等因素作相应调整. 1.1 用培养基或 PBS 将1mg/mL 的LysoView Green 原液稀释,建议终浓度至少为

1 ?M.为了降低由染色液过量导致的假阳性,应该尽量使用较低的工作浓度. 注意:如果细胞染色后用不含染色液的培养基孵育,会出现荧光信号衰减和细胞起泡的现象. 1.2 对于贴壁细胞,在干净的培养皿内用盖玻片让细胞爬片至合适的细胞密度,弃去培 养液,加入适量预热至 37℃ 的染色液,根据不同类型的细胞在合适的条件下孵育

30 分钟~2 小时.弃去染色液,加入新鲜的培养基,使用荧光显微镜选择合适的滤 光片镜检染色结果.如果细胞染色不充分,建议提高染色液的浓度或者延迟孵育的 时间. 1.3 对于悬浮细胞,离心细胞,弃去上清液;

缓慢加入预热至 37℃ 的染色液,根据细胞 类型选择合适条件让细胞与染色液孵育

30 分钟~2 小时;

离心细胞,用预热的新鲜 培养基重悬细胞;

用荧光显微镜选择合适的滤光片镜检染色结果.如果细胞染色不 充分,建议提高染色液的浓度或者延迟孵育的时间.亦可以用 BD Cell-Tak(BD Biosciences)处理悬浮细胞,让细胞吸附于盖玻片上,然后按贴壁细胞的方法染 色(见步骤 1.2)