PDF《ᖂᇘ⌕催य़ഛ䋼ᴎࠊ໛替莫唑胺白蛋白纳米粒》

2 ml 冻干后称重,记作 Wt.每个样品重复测定

3 次,计算得

1 白蛋白纳米 粒的包封率 EE 为(52.16±2.23)%,载药量 DL 为(5.33±0.10)%. 2.4 脑内递药特性研究 2.4.1 脑透析液中

1 分析方法的建立 色谱条件同 2.3.1 项. 标准曲线 : 精密称取减压干燥至恒重的

1 2 mg, 图11白蛋白纳米粒的透射电镜照片 (*40 000) 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2013, 44(1) ・ ・

43 置100 ml 量瓶中,用0.5%乙酸溶解并定容,得20 ?g/ml 的1标准贮备液.以人工脑脊液将其稀释 成0.

1、0.

2、0.

4、0.

6、0.

8、1 和2?g/ml 系列浓度 标准溶液,分别进样测定,以峰面积 A 为纵坐标,

1 浓度 c 为横坐标进行线性回归,得标准曲线方程 A=66.109 0c+1.306 5,r=0.997 8,表明

1 在0.1 ~

2 ?g/ml 范围内与峰面积线性关系良好. 专属性考察 : 分别取

1 标准溶液、空白透析液 和大鼠尾静脉给予

1 白蛋白纳米粒

30 min 后所收 集的透析液样品进样测定, 考察专属性.结果表明, 透析液中内源性物质对样品的测定无干扰,方法专 属性较好 ( 见图 2). 精密度及方法回收率测定 : 精密移取低、中、 高浓度 (0.

2、0.6 和1?g/ml) 的含

1 透析液适量, 按 2.3.1 项下色谱条件测定,分别在

1 d 内测定

5 次和连续

5 d 测定,计算得低、中、高浓度溶液 的日内和日间 RSD 分别为 6.41%、2.44%、3.12% (n=5) 和7.62%、1.71%、2.60% (n=5) ;

计算得样 品方法回收率分别为 93.33%、94.73%和96.80%, RSD 分别为 2.95%、3.16%和1.71% (n=3). 2.4.2 大鼠脑微透析手术 SD 大鼠以 10%水合氯醛 (300 mg/kg) 腹腔注 射麻醉,将头固定于大鼠脑立体定位仪上,暴露颅 骨,定位前囟,并以前囟为微透析探针定位的参考 点.在前囟后 5.2 mm、矢状线右旁开 5.1 mm 的骨 表面处,用牙科高速钻机在颅骨上钻开一能嵌入微 透析探针底座 (MD-2251) 的小口.将微透析探针 埋入脑骨表面下 4.0 mm,即右侧海马,并用牙托 粉和颅骨螺钉将底座固定于颅骨上.术后大鼠单 笼生理恢复

7 d[ 温度 (25±1)℃ ;

相对湿度 50%~ 70% ;

昼夜

12 h 人工交替 ;

自由饮食和饮水 ]. 2.4.3 微透析脑探针在体回收率的测定 运用反微透析法 [8] 测定

1 脑微透析探针的在 体回收率.按 2.4.2 项下方法操作,以含

1 浓度 分别为 0.

2、0.6 和1.0 ?g/ml 的人工脑脊液对大鼠 进行灌流,流速为

2 ?l/min,每30 min 收集透析液

60 ?l,共收集

8 h.按 2.3.1 项下色谱条件测定

1 浓度,按下式计算探针于右侧海马部位的在体回 收率. 在体回收率 /% = cper-cdia cper-cBIF *100% 其中,cper、cdia 和cBIF 分别为透析液、灌流液和脑 组织间液中

1 的浓度.在反微透析过程中,假设探 针周围脑组织间液中

1 浓度近似为零 (cBIF ≈ 0).所得1的平均在体回收率为 (19.09±1.15)%,用于脑 内海马部位透析液中实际药物浓度的校正. 2.4.4 给药方案及样品采集 取 2.4.2 项下恢复后的大鼠

6 只,随机分为

2 组,每组

3 只,给药前禁食

12 h,自由饮水,两 组分别尾静脉给予1溶液剂(即1的乙酸溶液, pH 5) 和1白蛋白纳米粒混悬液 (1 白蛋白纳米粒冻干品 加生理盐水复溶得到 ),剂量以

1 计均为

8 mg/kg. 以5?l/min 的流速向微透析脑探针内灌流复方氯化 钠溶液,平衡

30 min 后,流速调为

2 ?l/min,用自 动恒温冷冻收集器每隔

15 min 连续收集透析液