PDF《红壤水分条件对柑橘叶片氨基酸及多胺含量的影响*》

32 cm、

27 cm 和38 cm, 装土

20 kg. 盆栽定植橘苗抽枝发梢后, 选30 cm 高,

4 个分枝, 长势、胸径等生长特征均相近 的橘苗进行水分调节处理.试验期间, 每年

9 月下 旬和

10 月上旬采集新梢正常叶片(约倒数第 4~5 片叶)作为实验室化学成分分析所用. 设置

5 种水分处理, 分别用 SWC

30、SWC

45、 SWC

60、 SWC75 和SWC90 表示, 即保持盆内

25 cm 深度的土壤含水量分别为最大田间持水量的 30%、 45%、60%、75%和90%.每处理

5 个重复. 土壤含水量控制与监测:用土壤水分探头(MP-406, 澳大利亚 ICT 公司)实时监测盆内土壤水分 含量, 按盆内土壤重量适时加水, 控制盆内土壤相对 含水量在试验设计范围内(上述各量值的±5%内). 1.3 分析方法 叶片全氮含量采用开氏法测定[9] , Pro 含量采用 水合茚三酮法测定[10] , 多胺(PAs)含量测定在刘俊 等[11] 方法的基础上加以改进.即, 称0.5 g 鲜样, 加入1.6 mL 预冷的 5%HClO4 冰浴研磨成匀浆后冰浴

1 h, 于14 000*g 离心

30 min(4 ℃), 取上清液

1 mL, 加入

2 mL

2 mol NaOH 和10 μL 苯甲酰氯, 涡旋混匀,

37 ℃水浴下孵育

30 min;

加2mL 饱和 NaCl 和3mL 乙醚混匀淬取, 于10 000*g 离心

5 min, 取1.5 mL 乙 醚相, 通风橱中将乙醚吹干, 溶于

100 μL 甲醇, 保存 在?20 ℃冰箱中待测.HPLC 流动相为 64%的甲醇 (用超纯水配制). 检测条件: ODS-反相 C18 柱(150 mm *6 mm), SPD-6AV 紫外检测, 波长

254 nm, 柱温

25 ℃, 流速 0.5 mL・min?1 , 样品进样量

10 μL.以Put、 Spd、 Spm(Sigma 公司)作标准曲线, 进行样品 Put、 Spd、Spm 含量的定量分析. 数据用 Excel

2003 和SAS 9.0 软件分析统计, 结 果所用数据为

2 年各指标项分析和观测数据的平均 值, 单位用鲜叶(FW)计算.

2 结果与分析 2.1 红壤水分条件对柑橘鲜叶叶片氮含量的影响 氮是组成蛋白质、氨基酸的基本元素.由图

1 可知, 柑橘叶片氮含量在土壤相对含水量 75%处理 时达最大值 6.438 mg・g?1 (FW), 随着土壤水分的下 降或增加, 其含量均呈下降趋势.柑橘鲜叶中氮素 含量和土壤水分之间无线性相关, 表明土壤水分含 量的变化引起柑橘叶片对氮素吸收的差异, 同时引 起柑橘相应的生理适应性变化. 2.2 红壤水分条件对柑橘鲜叶游离氨基酸总量和 脯氨酸含量的影响 不同土壤水分条件下, 柑橘叶片游离氨基酸总 第1期周静等: 红壤水分条件对柑橘叶片氨基酸及多胺含量的影响

87 图1红壤水分条件对柑橘叶片氮含量、脯氨酸含量和氨基酸总含量的影响 Fig.

1 Effects of red soil moisture on N, proline and amino acids of citrus leaves 量(y)随土壤相对含水量(x)的增加而下降, 两者间呈 显著线性负相关(y=?0.028 2x+12.049;

R2 =0.852 4* ;

n=50).游离氨基酸总量在 SWC30 处理时最高, 为11.192 mg・g?1 (FW), SWC90 处理时最低, 为9.691 mg・g?1 (FW), 从SWC45 到SWC60 处理, 游离氨基 酸总量显著降低.柑橘叶片脯氨酸(Pro)含量(y)在SWC75 以下处理土壤水分条件下, 与SWC(x)呈显 著线性负相关(y=?0.015 2x+4.224;

R2 =0.860 5* ;

n=40), Pro 含量在SWC30 处理时为最大值3.738 mg・g?1 (FW), 在SWC75 处理时为最小值 3.147 mg・g?1 (FW), 到SWC90 处理时为3.286 mg・g?1 (FW), 上升 4.45%.差异显著性检验表明, SWC30 和SWC45 之间、 SWC60 和SWC75 处理之 间Pro 含量均无显著差异, SWC45 与SWC60 以上的 水分处理之间 Pro 含量则分别达到差异显著水平. SWC45 处理 Pro 含量比 SWC60 处理上升 15.8%, 表 明土壤相对含水量在 45%及以下条件下, Pro 含量显 著增加.土壤干旱或过多水分处理, 使柑橘叶片 Pro 含量上升.Pro 含量与游离氨基酸总量的比值在 SWC60 和SWC75 处理下比其他土壤水分处理显著 降低. 比较柑橘叶片氮含量、 游离氨基酸含量和 Pro 含 量与土壤水分之间的关系, 柑橘叶片氮素含量的变化 并不直接反映土壤水分变化, 叶片游离氨基酸总量 和Pro 含量的的变化可以反映土壤水分条件的变化. 2.3 土壤水分条件对柑橘叶片多胺含量的影响 多胺(PAs)主要包括腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)等.植物在受到水分胁迫时, 组织液内 PAs 浓度发生急剧变化[4] .由图