PDF《望星银 , 塑里：》

0 4 x稀释倍数

1 2

3 辅助荆的筛 选筛选经济 、 取材方便、便于运输 . 在常温下 保存三年 不 影响 病毒活性 的辅助荆.文 山松 毛虫质型多角体 病毒杀虫 剂 主要 为 乳悬 剂.1.2.4DpwC P V. HL制剂的产 品 质量 检 测和 安生性试验 ¨ 将Dp wC P '

V- HL制剂 进行产品活性 测 定和 安 生性 检测,对病毒原生物 活性与制 成产品后 的生物活性 进行比较 . 按常规毒力测 定 方法 进行.同 时, 根据 国际 标准(FB478g、1-

4789、24.48)对所研 翩的产品进 行府原馓生物的检测 . 检测的主要 对象 是沙门氏 菌、志贺氏菌 、 大肠 杆菌和细菌 总致等八唾指标.经 检验合格后, 再进行实验动物 的 急性 试验 . 以保证 产 品的 安全 性和稳定性 . 按照Ho r n氏 方法 进行 b】 .

1 .

2 .

5 微生物检验按我国卫生 防疫 细菌 检验方法 进行 逐项 检查 】 .

1 .

2 5 .

1 杂菌总数检 测取DpwC P V- HL制剂1mL注入无菌平皿中. 同 时取 制剂1mL作l0-.~1

0 叫稀释,取各 稀释 液1m1 J 分别 注入无菌 平皿中. 再加 入 事先 溶化 并玲至45℃细菌培养基 , 摇匀.待玲却后放入37℃恒温 糖 培养

2 4 h . 取 出作 菌 落计 数.1.2.5.2大肠 杆 菌群 检测用无菌 吸 液管 吸 取扁 毒制剂

1、0.

1、0.

01、0.001mL分 别接 种到 4支单 倍 乳糖 发酵管中.经37℃培养18--2

4 h . 若有产酸产 气管贝I转接伊红 美兰平板 . 挑选 可疑菌落 做重复发 酵试验.乳糖 管不产酸不产 气者 即为 大肠杆菌群 阴性 .

1 2 .

6 致病 菌检测 取病毒{ 鹤剂

5 m L加无 菌水

4 9 5m L , 加化学沉淀剂, 充分摇匀, 静置

6 0 m j n , 将上清液倒 入另一无菌 瓶 中备 用.取沉淀 直接做下 列 菌的 分离,按常规法 作进一步鉴 定.1.2.6.1志贺氏菌 直接 分 离法 : 取0.1mL沉淀 直接用SS平 板分 离.增菌培养 取病毒制剂0.5mL接种l0mL单倍9N增 菌液.再取 病毒稀释 液100mL , 接种100mL双倍 GN 增 菌液 , 将 上述 二种 培 养液 置37℃ 恒温培养箱 中培 养6~8 h后,用SS和 HE平板进行分 离.1.26.2沙门氏细 菌 检验 沙门氏菌 需 先接 种选择性 不同的增菌培养 基 .取 病毒制剂0.5mL接种干单倍SEM增苗液中.在37℃恒温箱中培养

1 8 - -2

4 h后用 S S和HE平板 分离.另取 前述病毒制剂稀释液100mL 注入双倍SEN增菌 液.置37℃ 恒温 培养箱中培 养l8~2 4h , 再经SS.WS及 麦康 凯平板分离 .

1 .

2 .

6 3 耶尔森氏菌 取沉淀0.5mL直接用麦 康 凯平 板 分离 , 置25℃ 培养

4 8 h .

1 .

2 6 .

4 穹肠弯曲菌 取沉淀0.1mL直接用布 氏平 板分 离.置42℃培养48h.1.2.6.5弧菌取病毒制剂0.5mL接 种干

1 0mL单倍 硷 胨水 . 另取前 述病毒制剂 稀释液100mL接种二倍碱胨水 . 然 后分 别装入37℃ 恒 温箱 中培养

1 2 h后转 接大平板 分离.1.2.6.6化脓 性球菌取沉淀0.1mL直接 用皿平 板分离,另取 沉淀 1mL接种l0mL却浦 曼增菌液 置37℃ 恒 温培 养箱中培 养22--2

4 h后转 接 却浦 曼 平板 .

1 .

2 .

6 .

7 炭疽 杆菌取沉 淀0.1mL直接用平 板分 离.1.26.8厌氧 菌取沉淀

1 mL接种 疱 肉培 养 基增 菌48h后转 接 皿平 板作厌氧 培养.1.27动物急性 毒性实验维普资讯 http://www.cqvip.com 第 2期 彭辉 银等 : 文 山松 毛虫 质型多角体 病毒杀虫 剂 的研 制151动物 急性 毒性 实 验参 照陈 尔厚等川 方 法进 行.分为IE1服、灌胃、腹腔注射共三十处理.每十处理设实验