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2016 年半年度报告

8 载体,转染转基因羊体细胞并筛选,PCR鉴定和GFP表达分析表明GFP有效置换 并获得了表达.

3、正常羊G6位点(无标记基因)定位整合平台的建立 ①完成G6位点表达HLA基因的定位插入载体的构建,并在该同源重组载体 中抗性基因两侧引入frt序列,以利于标记基因的删除.②获得了HLA表达载体定 位整合于G6位点的转基因细胞株,并开展了核移植,该转基因羊可用作G6位点 (无标记基因)定位整合工具羊.

4、LEN介导的Prnp位点基因敲除和插入研究 ①设计完成受精卵显微注射用删除框架,用于制备无抗性基因转基因羊.检 测结果表明基因敲除效率约为35%. 设计了TALEN介导的Prnp位点插入sp110 基因的定位插入载体,目前已完成转基因细胞株的制备,待进行核移植.

5、高产优质奶羊新品种培育 ①完成高产奶羊新品种培育十三五课题申报撰写与预算编制. ②完成了高产 奶羊新品种培育十二五课题结题材料.③开展了pBLG-cgh20转基因羊体细胞水 平的抗性基因删除研究.

6、LYZ羊的无标记基因转基因山羊制备体系 构建并验证了山羊Nramp1基因表达框架功能,Nramp1基因过表达可以增强 小鼠巨噬细胞的抗沙门氏菌、 BCG的感染和细胞内存活. 构建了2种通用的无标 记基因定点整合载体,并验证了各元件的功能.获得山羊Nramp1转基因定点整 合细胞,进行了核移植 .

7、抗瘙痒症转基因羊新品种的培育 完成新生羊基因型检测,开展朊蛋白转基因羊个体发育性能、繁殖性能、生 理生化等生产性能试验;

开展朊蛋白基因羊外周神经功能研究,朊蛋白基因敲除 羊外周神经形态正常,转基因羊对外界刺激能做出正常反应.

8、应用研究 上海杰隆生物工程股份有限公司

2016 年半年度报告

9 ①羊抗人血清白蛋白多抗的制备,本年度自制了羊抗人血清白蛋白多抗,共 获得抗血清150ml;

自制抗体有较好的乳中重组人血清白蛋白的特异, Western-Blot检测抗血清特异性好,抗体效价大于24000. 重组人溶菌酶微球制 剂对小鼠腹泻的治疗效果,②重组人溶菌酶-海藻酸钠微球载药率为1.8%,包封 率为49%;

微球在模拟胃肠液中4小时维持稳定性;

番泻叶造模小鼠腹泻模型检 测表明:与阴性组、阳性组、空载组相比较、中、低剂量rhlys微球组和rhlys组相 比较,高剂量rhlys微球组腹泻率下降最快,腹泻指数极显著降低(p