编辑: 没心没肺DR | 2018-05-28 |
20 目筛并在取样前充分混合,不立即分析的样品应放在冰箱中储存. 2. 称取 50g 样品和 5.0gNaCl 至一有盖容器中. 3. 加入 100ml 甲醇/水提取液. 4. 盖好盖子高速搅拌
1 分钟. 5. 静置 2-3 分钟,使样品沉淀. 6. 用Whatman GF/A 玻璃纤维滤纸过滤 10ml 萃取液,收集滤液到一干净容器中. 7. 取5ml 萃取液,加入 20ml 水稀释. 8. 过滤稀释液,待测. 检测程序(注意标准及样品做平行试验,可以提高检测的准确度及精确度) 1. 开始实验前要求试剂及样品萃取液达到室温. 2. 取适量的孔条固定在微孔板架上,未使用的孔条,与干燥剂一同放入密封袋中保存. 3. 加入 50ul 的酶标记物到微孔中. 4. 加入 50ul 的标准品及样品到相应的孔中,注意使用一次性吸头防止交叉污染 5. 加入 50ul 抗体溶液到微孔中,轻微震荡微孔板. 6. 室温下孵育
10 分钟. 7. 倒掉微孔中溶液,微孔中注满蒸馏水,然后到掉,重复
4 次,共五次洗板. 8. 最后一次清洗完后,倒掉孔中溶液,然后翻转微孔板在吸水纸上拍干. 9. 每孔中加入 100ul 的底物溶液. 10. 室温下孵育
10 分钟. 11. 每孔中加入 100ul 停止液. 12. 450nm 读吸光度值. 结果判断 1. 半定量结果的判定,可根据样品的吸光度值与标准的吸光度值来判定,样品的吸光度值低于某个标准的吸光度 值,则说明样品的黄曲霉毒素含量大于此标准的浓度, 样品的吸光度值高于某个标准的吸光度值, 则说明样品的黄曲 霉毒素含量小于此标准的浓度. 2. 定量结果判定,需要以标准的吸光率为 X 轴,标准浓度的对数为 Y 轴绘制曲线图,将标准浓度及吸光率的点用 直线连接, 根据样品的吸光率在 Y 轴上即可找到相应样品的浓度, 如果样品的吸光度值大于最小标准的吸光度值或小 于最大标准的吸光率,即可说明此样品中黄曲霉毒素的含量小于 2ppb 或大于 100ppb.