PDF《气相色谱 - 质谱法测定动物源性食品中的氯羟吡啶残留》

气相色谱 - 质谱法测定动物源性食品中的氯羟吡啶残留 Application Notes_C_GCMS-18 吕建霞 余天赛默飞世尔科技(中国)有限公司 目标 建立高效的气相色谱质谱检测方法,灵敏、快速测定动 物源性食品中的氯羟吡啶的残留量 样品中的氯羟吡啶用乙腈提取, 经碱性氧化铝小柱净化, 衍生后气质联用仪分析 方法检出限远远低于食品安全国家标准中规定的氯羟吡 啶最大残留限量 10?g/kg 引言 氯羟吡啶(3,5- 二氯 -2,6- 二甲基 -4- 羟基吡啶),其商品 名为克球粉(coyden),是一种预防鸡球虫病的饲料药物 添加剂,氯羟吡啶对

9 种鸡艾美耳球虫的防治均有良好 效果且价格便宜,因此在畜禽生产中应用广泛,但长期 使用或不按照规定使用将会造成氯羟吡啶在动物性食品 中残留.

有研究显示氯羟吡啶具有一定的致畸性和胚胎 毒副作用 [1] ,现在,欧盟已全面禁止氯羟吡啶在动物性 食品生产中使用,日本也禁止氯羟吡啶用于家禽.我国 规定氯羟吡啶在鸡肉中的残留限量为 10?g/kg[2] ,牛奶中 为20?g/kg[3] . 目前,有关动物组织中氯羟吡啶残留的检测方法报道较 多,主要有气相色谱法 [4] 、高效液相色谱法 [5-8] 、气相色 谱质谱法 [9-10] 、液相色谱串联质谱法 [11] 等.本研究建立 了一种简单、灵敏、可靠的检测动物源性食品中氯羟吡 啶残留量的方法.方法检出限为 5?g/kg,远远低于我国 对鸡肉和牛奶中氯羟吡啶的限量要求. 关键词 单四级杆质谱仪;

兽药;

碱性氧化铝小柱;

TG-5MS 色谱柱 仪器 Trace1310-ISQ 气相色谱质谱联用仪, 配EI 源(Thermo Scientific);

AS1310 自动进样器(Thermo Scientific) 恒温干燥箱(Thermo Scientific) 离心机(Thermo Scientific) 天平 漩涡混合器(Thermo Scientific) 耗材 色谱柱:TG-5MS(30 m*0.25 mm*0.25 μm)(Thermo Scientific, PN:26098-1420) 碱性氧化铝固相萃取小柱:2g,6mL 试剂与标准品 氯羟吡啶标准品:含量≥ 99%;

甲苯、乙腈、甲醇均为色谱纯 (Thermofisher);

无水硫酸钠: 优级纯,使用前在马弗炉内 450℃灼烧 4h,于干燥器中冷 却备用;

氯化钠:分析纯;

衍生剂:Sylon BFT(即体积比 为99:1 的N,O- 双三甲基硅基三氟乙酰胺 - 三甲基氯硅烷)

2 标准溶液的制备 储备液:准确称取 10.0mg 氯羟吡啶标准品,用甲醇溶解 稀释并定容至 100mL,得到 100mg/L 标准储备液,储存在 冰箱中备用. 标准中间液:准确移取氯羟吡啶储备液 1mL,用甲醇稀 释定容至 10mL,得浓度为 10mg/L 的标准中间液. 样品前处理 鸡肉样品:称取 2.0 g 于50 mL 离心管中,加入乙腈

10 mL, 于漩涡混匀器上振荡

1 min,再加入氯化钠 1.0 g,继续振 荡1min. 于10000 rpm 离心

10 min, 取上清液 2.5 mL 待净化. 碱性氧化铝小柱(2g,6mL)上层填入 1.0g 无水硫酸钠, 先用 5mL 甲醇、5mL 乙腈活化,然后加入待净化的样品, 再用 10mL 甲醇洗脱,用试管接收甲醇洗脱液,将洗脱液 在55℃下氮气吹干.待衍生. 牛奶样品:称取样品 1.0g 于50mL 离心管中,加入乙腈 5mL, 于漩涡混匀器上振荡

1 min,再加入氯化钠 1.0 g,继续振 荡1min. 于10000 rpm 离心

10 min, 取上清液 2.5 mL 待净化. 碱性氧化铝小柱(2g,6mL)上层填入 1.0g 无水硫酸钠, 先用 5mL 甲醇、5mL 乙腈活化,然后加入待净化的样品, 再用 10mL 乙腈淋洗小柱,待自然流下近干后用 10mL 甲 醇洗脱,用试管接收甲醇洗脱液,将洗脱液在 55℃下氮 气吹干.待衍生. 衍生:在上述试管中加入 100?L 甲苯溶解残渣,再加入 100?L 衍生试剂,密封后于 80℃衍生 60min,冷却后加入 800?L 甲苯,混匀后过 0.22?m 滤膜,待GCMS 分析. 实验条件 色谱柱:TG-5MS(30 m*0.25 mm*0.25 μm);