PDF《司法鉴定技术》

对于二联体,采集被检测男子与 孩子的样本用于检验. 样本一般是血液 (斑) 或口腔拭子 (唾液斑) , 其它人体生物学材料如精液 (斑) 、 带毛囊毛发、羊水、组织块等亦可作为亲权鉴定的样本.对于接受了外周血干细胞移植的当事人,应避 免采集其血样作为检验材料,宜取其口腔拭子(唾液斑)或毛发进行检验.样本必须分别包装,注明被 采样人姓名、编号、采样人、采样日期等,置于冰箱冷藏或冻存. 采样时,需要填写采样单,写明委托方名称、采样日期、采样类型、被采样人姓名、性别、称谓、 出生日期、证件号码等,并拍摄被采样人照片,由被采样人在采样单上留下右手拇指或食指指纹(婴儿 可留右脚拇趾印),并签名确认(婴幼儿的姓名由其监护人代签). 鉴定机构应有用于检材/样本的运输、接收、处置、保护、存储、保留和/或清理的规定,应对接收、 内部传递、处置、保留、返还和清理等过程进行记录,确保 保管链 记录的完整性和可追溯性. 鉴定机构应具有能识别各检材/样本的标识系统,并确保检材/样本在本鉴定机构的整个期间能得到 持续的识别. 5.2 DNA 提取和纯化 检材的DNA提取和纯化方法见GA/T383-2014中附录A内容. 5.3 DNA 定量分析 见GA/T 383-2014中6.1~6.3条款内容. 5.4 PCR 扩增与分型 5.4.1 基因座 5.4.1.1 选用多态性基因座(如STR、SNP等类型)进行PCR扩增,其中,常染色体STR基因座宜符合 如下要求: 1) 基因座定义和具有的特征已有文献报道;

2) 种属特异性、灵敏性、稳定性研究已实施;

3) 已有可供使用并公开发表的群体遗传数据,群体遗传数据包括从有关人群中获得的该基因座 等位基因频率或单倍型频率及突变率;

4) 遗传方式符合孟德尔定律;

5) 串联重复单位为四或五核苷酸. 5.4.1.2 除常染色体基因座外,建议在需要时增加Y-STR、X-STR的检验.其中,Y-STR系统可选择 DYS

456、 DYS389I、 DYS

390、 DYS389II、 DYS

458、 DYS

19、 DYS385 a/b、 DYS

393、 DYS

391、 DYS

439、 DYS

635、DYS

392、Y GATA H

4、DYS

437、DYS

438、DYS448等基因座进行单倍型检验;

X-STR系统 可选用GATA172D

05、HPRTB、DXS

6789、DXS

6795、DXS

6803、DXS

6809、DXS

7132、DXS

7133、 DXS

7423、DXS

8377、DXS

8378、DXS

9895、DXS

9898、DXS

10101、DXS

10134、DXS

10135、DXS10074 等. 5.4.2 PCR 扩增 SF/Z JD0105001――2016

3 建议选用商品化的试剂盒进行PCR扩增,每批检验均应有阳性对照样本(已知浓度和基因型的对照 品DNA和/或以前检验过的、已知基因型的样本)以及不含人基因组DNA的阴性对照样本.PCR扩增体 系与温度循环参数均按试剂盒的操作说明书进行. 5.4.3 PCR 扩增产物的检测与结果判读 使用遗传分析仪,对PCR产物进行毛细管电泳分析,使用等位基因分型参照物(Ladder)来对样本 分型,步骤方法按照仪器操作手册.

6 相关参数计算方法 6.1 三联体亲权指数(符合遗传规律)的计算 见表1. 表1 三联体常染色体STR基因座亲权指数计算公式 生母基因型 孩子基因型 生父基因 (推断) 被检父基因型 PI 值计算 公式 PP PP P PP 1/p PP PQ Q QQ 1/q PP PP P PQ 1/(2p) PP PQ Q QR 1/(2q) PP PQ Q PQ 1/(2q) PQ QQ Q QQ 1/q PQ QR R RR 1/r PQ QR R RS 1/(2r) PQ PR R PR 1/(2r) PQ QQ Q QR 1/(2q) PQ PQ P 或QPP 1/(p+q) PQ PQ P 或QQQ 1/(p+q) PQ PQ P 或QPQ 1/(p+q) PQ PQ P 或QPR 1/[2(p+q)] 注:p、q、r 分别表示等位基因 P、Q、R 的分布频率. SF/Z JD0105001――2016