编辑: 赵志强 2019-03-09

24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释

10 倍 以上) ,在CO2 培养箱中 37℃孵育过夜.第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物.约1~2 周可 筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基. ? 特别提醒 1. 对于某些类型的细胞如 HEK-

293、HEK293T、NIH/3T3 和COS 细胞,在转染前两天铺板可显著 提高转入基因的表达水平.如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞 的汇合度仍为 70~80%. 2. 对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度. 即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-EndoFectinTM 复合物仍能转染细胞,但是 DNA-EndoFectinTM 复合物必须在无蛋白存在的条件下形成.我们推荐使用 Opti-MEM ITM 培养 基以达到最佳转染效率.其他的无蛋白培养基则需测试与 EndoFectinTM 试剂的兼容性. 7. 对大多数细胞来而言,每1μg DNA 使用 3.0 μL EndoFectinTM 试剂都能获得较高转染效率.使用 者也可尝试每

1 μg DNA 使用 1~4 μL 体积 EndoFectinTM 试剂进行优化. 该产品仅限于实验科学研究用,若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途,本公司概不承担任何责任. 地址:广州高新技术产业开发区广州科学城揽月路

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