PDF《液质联用技术在生物毒素》

(四) 中性丢失扫描模式(neutral loss scan mode) 此模式中Q1和Q3的电压同步扫描,但保持一个特定 m/z值的电压差(off set). Q2是碰撞室,Q1和Q3的电压 差值与Q2内碰撞消除的一个特定中性分子的质量一致.因此,在离子混合物中,只有碰撞裂解后能丢失这一特定基 团的离子才会被Q3传输到检测器. 中性丢失 Neutral Loss/Gain to monitor loss or gain of specific moiety MS1 Collision Cell MS2 Scanning CID Scanning 三重四极 MS/MS MRM检测方式

(五) MS1 Collision Cell MS2 Static CID Static 多离子反应监测 Multiple Reaction Monitoring (MRM) minimises matrix interference high sensitivity accurate and reproducible quantitation 例一质谱测定: Progesterone孕酮

200 220

240 260

280 300

320 340

360 380

400 m/z

0 100 % 315.1 316.1 [M+H]+ O O CH3 CH3 CH3 全扫描(M/Z200-400) MS1 MS2 Collision Cell Static (m/z 315.1) Scanning 子离子扫描 Product Ion Scan 第一个四极杆让固定 Static 荷/质比的母离子通过,而第 二个四极杆选择一个合适的质量范围作扫描 Scanning . 第一个四极杆让固定 Static 荷/质比的母离子通过,而第 二个四极杆选择一个合适的质量范围作扫描 Scanning . Argon gas Argon gas Precursor Precursor Products Products 六极杆碰撞室 氩气 ? 在碰撞室里, 离子的动能转换成内能. ? 碰撞条件(断裂) 可通过控制加以改变: C 碰撞能量 (离子进入碰撞室的速度) C 碰撞的的机遇 (碰撞气的压力) O CH3 CH3 CH3 O 母离子 O CH2 CH2 H3C CH3 O CH3 子离子 孕酮的子离子产物

300 305

310 315

320 325

330 m/z

0 100 % 315.1 316.1 Mass Spectrum from MS1

100 125

150 175

200 225

250 275

300 325 m/z

0 100 % 109.0 97.0 Product ion spectrum from MS2 多离子反应检测 (MRM) 第一和第二四极杆质量分析器均固定质量/电菏比 Static 第 一四极杆只让母离子通过,第二四极杆让子离子通过. 第一和第二四极杆质量分析器均固定质量/电菏比 Static 第 一四极杆只让母离子通过,第二四极杆让子离子通过. MS1 MS2 Collision Cell Static (m/z 315.1) Static (m/z 109.0) Argon gas Argon gas Precursor(s) Precursor(s) Product(s) Product(s) MRM 子离子检测图孕酮 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 Time

0 100 % 2.75 1ng/mL Progesterone m/z 315.1 >

109.0 欧盟2003/181/EC 法规 根据欧盟规定,动物用药分为两类: Group A 为禁用为药物 (Banned Drugs) 为不得检出且完全禁止使用,法规对于这类药物的 检验方法有:最低检出极限要求 (Minimum Required Performance Limit ,MRPL) 如:硝基呋喃、氯霉素、孔雀绿、兴奋剂等 Group B 为合法可使用的兽药 (Legal Medicine) 对于不同的药物规定有不同的最大允许残留量(Maximum ResidueLimit , MRL) . 如:四环素类(10种)、磺胺类(20种) 、喹诺酮类 (20种)等 欧盟法规 各种离子的鉴别点数 关于鉴别点(intentification piont) 鉴别点数的规定 欧盟2002/1657/EC 法规(质量控制) 80%-110% 大于10 70%-110%

1 -10 50%-120% 小于等于

1 范围真实浓度(?g/kg) 没有标准物质(CRM)时,准确度可以通过测定空白基质中 加入已知量分析物的回收率获得. 准确度:重复分析标准物质,测定的含量(经回收率校 正后)平均值与真值的偏差指导范围如下: 准确度测定的规定 分析过程的质量控制 精密度(变异系数)

16 1

000 ?g/kg

23 100 ?g/kg 32*

10 ?g/kg 45*

1 ?g/kg 重现性 %CV 质量分数 在重复性条件下,实验室内CV通常在上述数值的一半到三份之二 之间.在实验室内重现性条件下进行的分析,其实验室内CV不应大于 上述重现性CV.质量分数低于100 μg/kg时,用Horwitz方程给出无 法接受的高值.因此,浓度低于100 μg/kg的CV应尽可能低. 在重现性条件下,对参考标准或加标样重复分析的实验室间变异 系数(CV),不得超出Horwitz方程计算的水平.该方程如下: CV=2xE(1-0.5logC) ? 对于每个诊断离子,信噪比 >