PDF《周栋西北农林科技大学预聘制教师_周栋》

四、主要研究内容及工作进展(限1000 字以内) 本人主要从事山羊生殖生理调控及布鲁氏菌致病机理的研究,工作内容及进展如下: 1. 类固醇激素在调控调节性 T 细胞(Treg)募集活化中的机理研究 Treg 对母胎免疫耐受的建立起关键作用, 而山羊子宫内膜细胞 (EEC) 是否参与 Treg 的募集,及EEC 与Treg 之间的对话机制尚未明确.应用类固醇激素刺激 T 细胞,发现 其能够诱导 T 细胞向 Treg 分化, 同时诱导其分泌 IL-10;

利用体外模拟体内激素变化 EEC 细胞模型,发现 EEC 能够诱导 T 细胞向 Treg 分化;

利用 transwell 迁移试验,表明激素 刺激后的 EEC 发生非折叠蛋白反应 (UPR) 、 Treg 招募因子表达量升高、 并能够募集 Treg, 而研究表明,UPR 能够引起细胞分泌包括 TGF-β 在内的 Treg 招募因子;

利用蛋白质组 学,分析附植期 EEC 的蛋白表达差异,共发现差异表达蛋白

113 个,目前正在进行功能 验证.以上研究表明,类固醇激素及其诱导山羊 EEC 产生的 UPR 能够对 Treg 发挥募集 及活化作用,在下一步研究中,将通过基因敲除、UPR 通路激活或抑制、抗体阻断等试 验, 筛选类固醇激素主要作用通路及调控因子, 定位EEC分泌的募集因子, 完善山羊 EEC 募集活化 Treg 的作用机理, 从UPR 角度阐明奶山羊 EEC 与Treg 的对话机制, 为山 羊母胎免疫耐受建立,提高家畜繁殖率提供理论依据. 2. 布鲁氏菌致病机理的研究 通过同源重组技术,成功构建布鲁氏菌 GntR、DnaA、ArsR、VceC、BtpB、OMP16 等基因缺失株及互补株.研究缺失株及互补株在增殖能力、菌落形态、毒力因子、不同 外界压力下的存活力以及在转录组水平上的影响等. 同时进行了缺失菌/互补株与宿主的 互作研究:1)不同基因缺失株在多种山羊及小鼠细胞中的增殖影响;

2)不同基因缺失 株对宿主细胞内质网应激、炎症反应、类固醇激素分泌、凋亡等调控作用影响;

3)不同 内质网应激状态对缺失株在胞内增殖的影响等;

4)不同缺失菌株对小鼠致病力影响等. 目前牛羊布鲁杆菌安全疫苗的缺乏,疫苗免疫和自然感染难以区分,以及布鲁氏菌 感染机理不明等缺点,成为制约畜牧业生产的三大瓶颈.我们已经建立起成熟的布鲁杆 菌基因缺失平台,为筛选布鲁杆菌主要毒力基因、研究致病机理奠定了良好基础.在下 一步的研究中,我们将继续进行毒力基因单敲除和多敲除试验,并通过蛋白组、转录组、 代谢组等组学研究,继续寻找布鲁杆菌主要致病基因,筛选区别疫苗免疫和自然感染的 靶点,并通过细胞试验和动物试验,探索布鲁杆菌的致病机理,为打破防控布鲁菌病的 三个瓶颈,有效防控牛羊布鲁杆菌病,推动牛羊养殖业的健康发展,提供理论和数据支 持.

五、省部级以上研究课题情况(限本人主持的研究课题) 请按照课题名称;

课题来源;

总经费;

到位经费;

主持人;

起止年月顺序填写. 1.非折叠蛋白反应在调控奶山羊子宫内膜上皮细胞募集与活化 Treg 的分子机制, 国家自然 科学基金青年项目,总经费 24.00 万元,到位经费 14.40 万元,主持,2018.01-2020.12;

2.山羊子宫内膜细胞的内质网应激反应对调节性 T 细胞功能作用的研究,陕西省自然科学 基金,总经费 5.00 万元,到位经费 5.00 万元,主持,2017.01-2018.12;

3. 生殖激素与子宫内膜细胞对子宫调节性 T 细胞功能的影响,中国博士后科学基金,总 经费 5.00 万元,到位经费 5.00 万元,主持,2016.04-2018.04;