PDF《牛校牛人牛团队,造就超牛新定量》

50 个/每次 以下,每次实验时间都接近两个小时,这些都制约 了客户更多的使用仪器,因此 PIXO 的定位,就是 个人化的定量 PCR, 进一步加快定量 PCR 普及化 进程,简单易用,精确快速,可以满足定量,等位 基因突变的熔融曲线分析,实时 HRM(高分辨熔 融曲线分析)等多种应用. 温控系统: 大部分的定量 PCR 仪,由于采用孔板式模 块,由于本身热容量和加热区域均较大,所以需要 采用多块 Peliter 加热,Peliter 之间本身就有温度 差异,孔间的温度均一性一般在 0.5°C 左右,边缘 效应也难以消除,变温后的平衡时间,大约需要

15 秒. PIXO 温控系统,包含了一个精密电铸的空心 银槽,其中密封了流动的传热介质,通过单个 Peliter(以保证温度的精确性)加热或制冷,电磁 马达驱动的两个相对的叶轮,进行快速的混匀,导 热介质在槽间流动,保证传热速率和均一性,而且 没有边缘效应,孔间温差小于 0.1°C,测试多台机 器在 65°C 时的均一性在 0.06°C,95°C 时为 0.1°C,特定的温控系统,保证了实验的 CV 值小 于0.25%. 光学系统: 激发端:采用两个不同波长的固定式

48 LED 阵列 (452-486nm, 542-582nm) 分列于孔板两端, 宽广谱激发, 激发光经过反射镜, 每孔均同时激发, 最大程度减少孔间干扰;

检测端:四个不同的滤光片(505-545nm, 562-596nm,604-644nm,665-605nm)通过一 个线性滑动滤光片架进行转换,高性能 CCD 进行 并行检测,发光波长无干扰,无需补偿和校正,每 循环

48 孔,均可以四通道实时检测. 通道激发波长 (nm) 发射波长 (nm) 检测荧光染料示例

1 452 -

486 505 -

545 DNA Binding Dyes, FAMTM

2 452 -

486 562 -

596 HEXTM , JOETM , VICTM

3 542 -

582 604 -

644 ROXTM , Texas Red?

4 542 -

582 665 -

705 Cy5? , Quasar 670TM 软件界面: 集成式软件,包含机器控制,数据采集,分析

图表等功能,简洁明了,友好易用. 软件打开, 即出现定量, 等位基因分析, HRM (高分辨熔融曲线分析)等功能界面,软件功能如 下: 1.用标准曲线做绝对定量;

2.Cq 法进行相对定量,可以对多个参照 基因定标;

3.利用终点熔融曲线法进行等位基因突变点 分析;

4.基因筛查及 HRM 分析. 实验设置简单形象,设置样品性质(标准品, 阴性对照,未知样品)等. 反应条件设置为图形界面,温度,时间一目了 然,反应进程均在界面上显示. 原始数据,扩增曲线,熔融曲线分析,分析结 果,PCR 扩展效率,R2,Cq 值均在报告中显示, 可以导出 Excel 或PDF 格式. 技术支持: 作为一款个人化的定量 PCR 仪,其技术服务 形式也采取了灵活便利的方式, 强调利用各种在线 及社区网络的形式,如Facebook,Twister,进行 应用技术的实时更新,提高客户的参与感,加强技 术资源的有效分享.