PDF《产品说明书》

Propidium Iodide ――细胞核红色荧光探针 产品货号 包装规格 C007

10 mg C008

1 ml, 1mg/ml 储存条件:-20℃,避光保存.

激发/发射波长:535/617 nm,bound to DNA 产品说明书 GeneCopoeia, Inc. 广州易锦生物技术有限公司 广州高新技术产业开发区广州科学城 掬泉路

3 号广州国际企业孵化器 F 区8楼邮编:510663

电话:4006-020-200

邮箱:[email protected]

网址:www.genecopoeia.com www.igenebio.com ?

2016 GeneCopoeia, Inc. Propidium Iodide 使用说明书

2 Propidium Iodide 产品货号: C007/C008 产品介绍 碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭 (EB)的类似物,能够嵌入碱基之间实现与 DNA 结合.这种结合没有或者几乎无序 列倾向性,大约每 4~5 个DNA 碱基对结合一个染料.PI 也能与 RNA 结合,因此需要 用核酸酶处理来区分 DNA 和RNA 染色.水溶液中 PI 的最大激发/发射波长为 493/636 nm.PI 一旦与核酸结合,荧光信号明显增强 20-30 倍,最大激发波长向红色 波段迁移~30-40 nm,最大发射波长向蓝色波段迁移~15 nm,从而使其最大激发/发射 波长变为 535/617 nm.PI 的摩尔吸光系数相对比较低,但是其具有足够大的斯托克斯 位移来同时检测核酸 DNA 和荧光标记抗体,只需要使用恰当的滤光片.PI 适用于荧光 显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪以及荧光计分析. PI 不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对细胞核染 色.利用这一特性,通常与 Calcein-AM、Hoechst

33258 或Hoechst

33342 等活细胞 荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定,用于细胞凋亡相关的研究. 也可以用作多重荧光染色的复染剂,兼容于各种细胞标记技术,包括直接或者间接的 荧光抗体检测、mRNA 原位杂交、细胞结构特异性的荧光探针检测法以及组织染色. PI 的单独染色也可以进行细胞周期的检测. 本产品包装形式为固体(10mg)和液体(1ml,1mg/ml)两种.收到产品之后储存于- 20℃并避光保存,固体至少可稳定保存

1 年,液体至少可稳定保存六个月. 光谱特征 Propidium Iodide 结合到双链 DNA 中的激发、发射光谱图 注意事项 ? 为避免反复冻融,建议适当分装. ? 对于微量的液体,每次使用前请先高速离心数秒,使液体充分沉降到管底. Propidium Iodide 使用说明书

3 ? 荧光染料不可避免的存在淬灭问题,请存放及操作时尽量注意避光,以减缓荧光的淬灭. ? 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作. 实验步骤 注意:如果需要对组织或未经固定的样品进行染色,本说明书中的实验步骤应作相应调整. 贴壁细胞复染(荧光显微镜观察) 样品准备:根据样品来源选择合适的固定方法对样品进行固定,一般在其它染色完成 后再进行 PI 复染.使用 PI 复染需要对细胞进行固定和透化处理. RNase 处理 如果样品使用多聚甲醛,福尔马林或者戊二醛固定,那么样品需要用 RNase 处理;

如 果样品是用甲醇/冰醋酸或者丙酮固定,通常无需 RNase 处理. 1.1 用2*SSC(0.3 M 氯化钠,0.03 M 柠檬酸钠,pH 7.0)冲洗样本. 1.2 将样品用浓度为

100 μg/ml,无DNase 的RNase(2*SSC 缓冲液配制)在37°C 温育

20 分钟. 1.3 用2*SSC 缓冲液冲洗样品,重复三次,每次

1 分钟. 样品复染 2.1 将样品置于 2*SSC 缓冲液中平衡. 2.2 将固体 PI 溶于蒸馏水配成