编辑: 笔墨随风 | 2019-07-08 |
在紫外灯下双链 DNA 呈现绿色荧光,而单链 DNA 呈红色荧光.通 过小鼠皮下注射试验,尚未发现 Gold View 有致癌作用,而溴化乙锭(EB)是一种强致癌 剂.因此用 Gold View 代替 EB 不失为一种明智的选择. 实验操作步骤: 100ml 溶胶液在微波炉中融化,冷却至 60℃左右(不烫手)后加入 10vl Gold View,轻 轻摇匀后倒胶,待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察. 注意事项: 1. 胶厚度不要超过 0.5cm,胶太厚会影响检测灵敏度 2. 加入 Gold View 的琼脂样凝胶反复融化可能会对 DNA 检测的灵敏度产生一定影响, 但不明显 3. Gold View 在PH 3.6-7.0 之间能更好的与核酸结合,因此电泳时最好使用新鲜的电 泳缓冲液 4. 由于 Gold View 产生绿色荧光,因此不适合于用一般单色胶卷拍照,可以使用凝胶 成像系统保存图像. 5. 含有 Gold View 的凝胶不适合于进行凝胶回收试验.要进行回收试验,请使用 EB 胶或 SYBR Green I 型核酸染色剂或 gelred 核酸染色剂. 6. Gold View 特别适合于大片段 DNA 的检测(大于 1kb 的片段,检测灵敏度与 EB 相当) ;
当DNA 片段小于 1kb 时,检测灵敏度低于 EB,特别是低于 500bp 的片段, Gold ViewI 型可能亮度很弱或者检测不到,如要检测小片段的 DNA,请选用 SYBRGreen I 型核酸染色剂,该染色剂适合检测所有片段大小的 DNA 片段. 7. 虽然尚未发现 Gold View 有致癌作用,但由于 Gold View 溶液酸性较强,因此对皮 肤,眼睛会有一定的刺激,操作时应戴手套. 应用特点: 快速:整个操作过程可在几分钟内完成,方便使用 高效:Gold View 可以检测 50ng 级的 DNA 或者 RNA 片段.其激发波长有多处,其中两处 最强:230nm 和490nm,客户可以调整紫外波长增强其荧光强度 方便:此试剂即开即用,使用方便 安全:尚未发现 Gold View 有致癌作用,使用该试剂不用接触 EB(溴化乙锭)等有害物质.