PDF《微生物高温碱性蛋白酶》

60 min后酶的剩余活性为96.4%和68.5%;

在无 CaCl2时,同等条件下,酶只能相对保留70%和14.2%的活性.CaCl2存在时,酶的半衰期增加了 20~100 min.另有报道Mg2+ 对芽孢杆菌产酶的活性 也有一定促进作用[9] .Radha等[18] 研究表明,Ca2+ 可能作为一个盐桥或离子桥来维持酶的构象或稳 定底物结合位点和酶复合物,从而使酶的活性增 加[18] .Cu2+ 、Hg2+ 等重金属离子明显抑制酶的活 性,这个特点和其他大多数的酶都是一样的[1,9,10] . 1.3 表面活性剂等对酶活的影响 通常情况下,表面活性剂可破坏氢键,影响 酶构象的稳定性,从而导致酶活降低或丧失.而 许多高温碱性蛋白酶对表面活性剂、螯合剂、漂 白剂及SDS等有较强的稳定性[3,4,9,10,13,17,19] ,这个特 点使高温碱性蛋白酶特别适用于复杂体系中蛋白 质的降解.如Bacillus mojavensis A21产生的高温 碱性蛋白酶在2 mmol/L和5 mmol/L的EDTA溶液 中,仅降低了约9%和28%的酶活性,显示了高温 碱性蛋白酶对EDTA较强的稳定性,可应用于添加 了螯合剂的洗涤剂的合成 [20] . 1.4 对有机溶剂的稳定性 最近,一些对有机溶剂稳定的高温碱性蛋白 酶被成功分离出来,它们大多来源于芽孢杆菌和 假单胞菌[8] .分离自Bacillus sp.中的一种高温碱性 蛋白酶在大部分有机溶剂(如苯、二甲基亚砜、己烷、甲苯等)中经过192 h发酵后仍保留了50%以上 的活性.

2 高温碱性蛋白酶的结构与功能的关系 高温碱性蛋白酶大多具有热稳定性好、水解 表1 不同高温碱性蛋白酶的来源与性质 酶的来源菌株 蛋白酶家族 最适pH 最适温度 热稳定范

70 °C加热1 h 分子量 参考 (°C) 围(°C) 后剩余酶活性 (kDa) 文献 Nocardiopsis alba strain OK-5 丝氨酸蛋白酶

10 70 37~80 75%

20 [1] Streptomyces sp. DP2 ―

8 ― 50~90 80% ― [2] Streptomyces sp. strain AB1 丝氨酸蛋白酶 11.5

75 40~85 90% 29.85 [3] Bacillus sp. SM2014 丝氨酸蛋白酶

10 60 40~80 95%

71 [4] Bacillus sp. B001 丝氨酸蛋白酶

10 60 20~90 80%

28 [5] Bacillus sp. HR-08 丝氨酸蛋白酶/

10 60 20~90 90%

29 [6] 金属蛋白酶 Anoxybacillus thermarum sp. Nov ― 7.2

65 55~67 ― ― [7] Pseudomonas aeruginosa PT121 金属蛋白酶

8 60 40~70 70%

33 [8] Vibrio metschnikovii J1 丝氨酸蛋白酶

11 60 50~75 30%

30 [9] Bacillus cereus SV1 金属蛋白酶

8 60 40~70 5% ― [10] Pyrococcus horikoshii 金属基质蛋白酶

11 95 30~90 70% ― [11] Pseudomonas aeruginosa KS-1 丝氨酸蛋白酶

9 60 40~80 75%

45 [12] Bacillus halodurans........