PDF《中华人民共和国国家标准》

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4 0 20.

30 词臀 中华人民共和国国家标准GB/T14926.43-2

0 0

1 实验动物 细菌学检测 染色法、 培养基和试剂 L a b o r a t o r y a n i ma l -B a c t e r i o o g i c a l mo n i t o r i n g - S t a i n i n g , m e d i a a n d r e a g e n t s

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0 1 -

0 8 -

2 9 发布

2 0

0 2 -

0 5 -

0 1 实施 中华人民共和匡国家质量监督检验检疫总婿www.grainnet.cn GB / T

1 4

9 2

6 .

4 3 -

2 0

0 1 前言本标准规定了实验动物微生物学检测的染色法、 培养基和试剂.在以前的相关标准中对染色法、 培 养基和试剂的具体内容没有进行描述, 基本上是引用 GB

4 7

8 9 .

4 -1

9 9

4 《 食品卫生微生物学检验 沙门 氏菌检验) ) , GB

4 7

8 9 .

1 0 一工

9 9

4 ( ( 食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验) ) , G B

4 7

8 9 . 工工-1

9 9

4 《 食品卫生微生物学检验 溶血性链球菌检验》 和GB4789.

2 8 -1

9 9

4 《 食品卫生微生物学检验 染色 法、 培养基和试剂》 中相关内容, 给本标准的使用造成不便.为将染色法、 培养基和试剂的配制方法和操 作程序标准化并便于查找, 特制定本标准. 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口. 本标准起草单位: 中国实验动物学会. 本标准主要起草人: 李红、 黄韧、 范薇. www.grainnet.cn 中华人民共和国国家标准实验动物 细菌学检测 染色法、 培养基和试剂 GB / T

1 4

9 2

6 .

4 3 -

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0 1 La b o r a t o r y a n i ma l - B a c t e r i o l o g i c a l mo n i t o r i n g - S t a i n i n g , me d i a a n d r e a g e n t s 范围 本标准规定了各种染色法、 培养基和试剂. 本标准适用于小鼠、 大鼠、 豚鼠、 地鼠、 兔、犬、 猴的细菌学检测.

2 原理实验动物微生物从培养基中摄取营养物质, 维持正常的生长繁殖和代谢, 其所含细胞物质能与各种 染料结合, 呈现不同颜色.

3 染色液的配制和染色法

3 .

1 革兰染色法

3 .

1 .

1 结晶紫染色液 结晶紫 1g

9 5 %乙醇

2 0 mL

1 %草酸钱水溶液

8 0 mL 将结晶紫在乳钵内研磨, 用乙醇溶解, 加人草酸按水溶液混合, 即可使用.

3 .

1 .

2 碘液 碘1g 碘化钾29 蒸馏水

3 0

0 mL 将碘化钾与碘先用少量水溶解, 待全部溶解后, 加蒸馏水至

3 0

0 mL ,

3 .

1 .

3 脱色液

9 5 %乙醇

3 .

1 .

4 沙黄( 番红) 复染液 沙黄

0 .

2 5 g

9 5 %乙醇

1 0 mL 蒸馏水

9 0 mL 将沙黄在乳钵内研磨. 用乙醇溶解, 加人蒸馏水混合 , 即可使用.

3 .

1 .

5 染色法

3 .

1 .

5 .

1 涂片风干后在火焰上固定.

3 .

1 .

5 .

2 滴加结晶紫染色液, 染色

1 mi n , 流水冲洗, 甩干. 中华人民共和国国家质I t监督检验检疫总局2

0 0

1 -

0 8 -

2 9批准

2 0

0 2 -

0 5 -

0 1实施1www.grainnet.cn GB/ T

1 4

9 2

6 .

4 3 -

2 0

0 1

3 .

1 .

5 .

3 滴加碘液, 媒染

1 mi n , 流水冲洗, 甩干.

3 .

1 .

5 .

4 滴加9

5 %乙醇脱色约

1 5 ^3

0 s , 流水冲洗, 甩干.

3 .

1 .

5 .

5 滴加沙黄复红染液, 染色1 mi n , 流水冲洗, 甩干, 风干或滤纸吸干后镜检.

3 .

1 .

6 结果 使用油镜放大

1 0

0 0 倍观察, 革兰阳性菌呈蓝紫色, 革兰阴性菌呈红色.

3 .

2 姬姆萨染色法