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0 Ap r i l
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0 3 单克隆抗体技术在水生 动物病毒研 究 中的应用 盛慧英
2 ,吴小平 ,张奇亚
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1 .
南 昌大 学生 命科 学与 食品 工程 学院, 江 西南 昌,330047;
2.中国科 学 院水生 生物 研究 所,淡冰 生态 与生 物技 术 国家重 点实 验室 , 湖 北武汉 ,
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7 2 ) App l i c a t i o ns o f M o no c l o na l Ant i bo dy Te c hn o l o g y i n Vi r o l o g y o f Aqua c ul t u r e S HE NG H u i ― y i n g , , WU Xi a o ― p i n g , Z H ANG Q i ― y a
2 (
1 . C o l l e g e o f L i f e S c i e n c e a n d F o o d E n g i n e e r i n g . N a n c h a n g U n i v e r s i t y ,N a n c h a n g
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4 7 ,C h i n a ;
2 . S t a t e K e y L a b o r a t o r y o f F r e s h w a t e r E c o l o g y a n d B i o t e c h n o l o g y , I n s t i t u t e o fH y d r o b i o l o g y , C h i n e s e A c a d e m y o f S c i e n c e s , W u h a n
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7 2 , C h i n a ) 关键词 :单克隆抗体 ;
水生动物 ;
病毒病 ;
抗原表位 ;
疫苗 中图分类号 :$
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2 .
6 5 文献标 识码 :A 文章编号 :1
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3 .
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0 4 单克隆抗体技术作为病毒病检测与 防治的有 力武器 ,在 人类 、畜牧 兽禽 等 的病毒 病控 制 与预 防 中发 挥出日益 显著 的 作用 .从 二十 世纪 八十 年代 中期Chinchar等研制蛙虹彩病毒 ( F r o g v i r u s
3 , F V3 ) 单抗 开始…,这 一技 术 及其 研究 成 果也 运用 于水生动物病毒学研究中.尤其是近年 ,人们对水产品蛋 白质不 断增 长 的需求 ,使水 产养殖 业 呈现 突飞 猛进 的发展势头 ,但普遍流行的水生动物病毒病 已造成 巨大 经济损 失 .滥用 药物 不仅 防 治效果 差 ,而且 严 重污染水体及生态系统 .利用生物技术和环保方式 对水 生动物 病 毒病进 行防治,就成 为人们 关注 的热 点.因此,单抗技术在水生动物病毒病研究中得到 越来 越广 泛 的运用 ,并 有新 的进 展 .本 文就 此作 一 综述 .
1 水生动物病毒单克隆抗体的种类 与人类及高等脊椎动物 的单抗研制运用技术 相比,水 生动物 病 毒单 抗研 制及 相关 技术 的运 用虽 较 为薄 弱 ,但也 有一 定积 累(表1),这 为水 生动物 病 毒单 抗 的研 制 开发 奠定了基 础.2水生动物病毒的诊断 经典血清学方法在水生动 物病毒病的研 究中起着重要作用 ,现在仍然还是水生动物病毒病原检 测和 分析 的常 用方 法[
1 7 ,
1 8 ] ,但对 进 一步 鉴定 不 同型 别 的病原 毒株 却有 一定 的局 限性 .单抗 用于 水 生动 物病毒诊断 , 除了具有快速、 灵敏和特异性的优点, 并可 以对强 毒株 和 弱毒株 进行 鉴 别诊 断 ,这是 利用 多抗 很难做 到的.1995年 ,Na k a j i ma等制备了红海真鲷虹彩病 毒(Reds e a b r e a m i r i d o v i r us . RS Ⅳ )的单 抗 ,随 后 结合免疫荧光技术( I mmu n o f l u o r e s c e n c e ,I F ) ,对可 能感染病毒的红海真鲷 ,海水鲈鱼,石首鱼和琥珀 鱼等十余种海水鱼进行检测 ,红海真鲷和几种海水 鱼 的脾脏样呈阳性结果 ,表明利用 RS I V 单抗和 I F- Ma b方法不仅可准确诊断海水鱼虹彩病毒病 , 而且显示 R S I V 和其它海水鱼类 中分离的虹彩病 毒具有 高度 抗 原相关 性【ltl.Fichtner等 利用抗病 毒性 出血性败 血症病毒 ( V i r a l Ha e mo r r h a g i c S e p t i c a e mi a V ir us , VH S V)的 单抗 ,建立 了相关的免疫电镜技术,并鉴定了从欧 洲虹鳟鱼 中分离到的 V HS V .这种病毒仅从超微 形态方面与其它弹状病毒难 以区分,利用单抗及免 疫 电镜技术则可 以对病毒核衣壳结构进行特异识 别和 鉴定,同时 ,还可以准确 监测 该病 毒在 宿主 细 胞中的形态发生过程. 当单抗技术与流式细胞检测技术相结合,显得 比间接免疫荧光技术更敏感、有效 ,能在更早期检 测到病毒 】 .