PDF《四物汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂 指纹图谱比较》

第17卷第9期Vol.

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2011 年9月September.2011 Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy 四物汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂 指纹图谱比较 雷艳青1 , 雷鹏2 , 刘韶2 , 李新中2 (通讯作者 ) (1.湖南省脑科医院, 湖南 长沙 410007;

2.中南大学湘雅医院, 湖南 长沙

410008 ) [摘要] 目的: 为探讨中药配方颗粒在中药复方中应用的可行性, 本研究选取补血名方 "四物汤" 为实验对象, 对该方的 传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂进行中药指纹图谱的比较. 方法: 采用高效液相色谱、 二极管阵列检测器: 色谱柱为C18 (Dia- monsil

250 mm*4.6 mm,

5 μL) ;

流动相中, 流动相组分A为水, B为甲醇, C为0.05%磷酸;

梯度洗脱, 条件为组分C保持10%不变, 组分B从0到90%;

检测波长为280 nm;

流速为1.0 mL ・ min-1 ;

柱温:

35 ℃. 结果: 同一批药材的两种汤剂其HPLC指纹图谱相似性 好, 相似度0.924. 6批不同厂家的汤剂间指纹图谱基本一致, 相似度在0.70-0.98. 结论: 方剂四物汤的中药配方颗粒与传统饮 片汤剂比较, 指纹图谱相似性好, 提示内在化学成分基本相同. [关键词] 四物汤;

传统饮片汤剂;

配方颗粒汤剂;

HPLC指纹图谱 [中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X (2011 ) 09-0072-04 Comparing study on the fingerprint between the traditional slice decoction and the dispensing granule decoction of Siwu Decoction Lei Yan-qing1 , Lei Pen2 , Liu Shao2 , Li Xin-zhong2 (1.Hunan Brain Hospital, Changsha, Hunan province, 410007, China;

2.Xiangya Hospital, Central South University, Changsha, Hunan, 410011, China) [Abstract] Objective: In order to discuss the feasibility of application of dispensing granule to complex prescription, this thesis selected a famous Chinese Decoction named Siwu Decoction for subjects, and compared traditional slice decoction with dispensing granule decoction by determining the fingerprints.Methods: Adopting methods of HPLC with DAD for its HPLC fin- gerprint. The HPLC fingerprint of Siwu Decoction: C18 (Diamonsil

250 mm*4.6 mm,

5 μL) was used as reversed column;

mobile phase: water、 methanol and 0.05%H3PO4 in a gradient mode;

Wavelength:

280 nm;

Column temperature,

35 ℃;

Flow rate: 1.0 mL ・ min-1 .Results: The HPLC fingerprints' semblance of these two decotions made of same slice was as greater as 0.924 . The fingerprints of six decotions ,which included the four decotions from four companies, were similar with no remarkable diversity that the their semblance were rang from 0.70 to 0.98. Conclusions: From the results of this study on the the fingerprints of Siwu Decoction, we can draw a conclusion that the dispensing granule ,which has the same contents as in the traditional slice decoction, has great prospect for being researched and developed, and can acclimatize to the demand of its clinic use when the Siwu Decoction has to be used. [Key words] Siwu Decoction;

Tradition slice decoction;

Dispensing granule decoction;

Fingerprint 中药现代化的瓶颈是中药材的质量不可控, 进而造成临 床疗效的不稳定, 甚至不确定;

近年来, 除了对所含主要成分 的控制外, 在中药质量可控技术的发展中, 中药指纹图谱技 术是符合中医理论及现状的较好的质量控制技术[1] . 中药指 纹图谱, 是指中药经适当处理后, 采用一定的分析手段, 得到 的能够标示该中药特性的共有峰的图谱[2] . 我们利用高效液 相色谱法, 对四物汤的传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂进行了 高效液相色谱指纹图谱 (HPLC-fingerprint ) 研究, 进行了相应 的方法学考察;

同时对比两者的HPLC-fingerprint特性及相关 参数,从而对这两种制剂的内在化学成分进行比较和研究;

并且考察了不同厂家出品的配方颗粒汤剂的指纹图谱.

1 仪器与试药 1.1 仪器 Agientl100高效液相色谱仪一套, 包括G1311A四 元梯度泵、 G1313A自动进样器、 G1311A柱温箱、 G1315A二极 管阵列检测器 (美国惠普公司 ) . AG285分析天平 (德国梅特勒 公司 ) ;

KS-600D超声清洗机 (宁波科生仪器厂 ) . 1.2 试药 对照品: 阿魏酸 (批号: 0773-9910 ) 、 芍药苷 (批号: 0736-06118 ) ,由中国药品生物制品检定所提供.药材: 熟地、 当归、 白芍、 川芎饮片由湖南九芝堂制药有限公司提 供;

配方颗粒自制: 熟地、 当归、 白芍、 川芎配方颗粒, 与饮片 为同一批;

熟地、 当归、 白芍、 川芎配方颗粒分别由三九医药 股份有限公司、 江阴天江药业有限公司、 广东一方制药有限

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2011 年9月September.2011 公司、 四川绿色药业科技发展股份有限公司提供. 试剂: 甲醇 (色谱纯 ) 、 其他试剂 (分析纯 ) 、 流动相用水 (重蒸馏水 ) .

2 实验处方与汤剂制备 2.1 处方 熟地15 g, 当归15 g, 白芍15 g, 川芎15 g. 2.2 传统饮片汤剂制备 按处方比例称取以上4味药材, 加入 水300 mL, 煎煮45 min, 滤过;

滤渣加水240 mL, 煎煮30 min[3-4] , 滤过;

合并2次滤液, 调整体积至250 mL, 备用. 2.3 配方颗粒汤剂制备 称取与药材相当量的四味配方颗 粒, 混合, 加入80 ℃-100 ℃左右的水200 mL搅拌溶解, 冷后加 水至250 mL, 备用.

3 四物汤指纹图谱的建立 3.1 色谱条件 色谱柱: C18 (Diamonsil

250 mm*4.6mm,

5 μL) . 流动相: 流动相组分A为水, B为甲醇, C为0.05%磷酸. 梯度洗脱条件: 组分C保持10%不变, 组分B从0到90%. 流速: 1.0 mL ・ min-1 ;

检测波长:

280 nm;

柱温: 35.0 ℃;

进样量:

5 μL. 指纹图谱的梯度洗脱时间程序见表1. 表1 梯度洗脱时间程序 时间 流动相组成 (% ) (min ) 水 甲醇 0.05%磷酸

0 90

0 10

3 85

5 10

12 75

15 10

16 65

25 10

27 50

40 10

35 48

42 10

40 30

60 10

50 0

90 10 3.2 供试品溶液的制备 精密吸取四物汤10 mL, 水浴蒸干, 残渣加甲醇溶解, 分取甲醇液, 浓缩定容至10mL. 进样前用 0.45 μm滤膜滤过, 即得. 3.3 精密度试验 精密吸取同一四物汤供试品溶液, 连续进 样5次. 结果表明, 各共有峰的相对保留时间和相对峰面积基 本一致, RSD%