PDF《2018年第29届国际生物奥林匹亚国手选拔营 植物实作题》

1 2018年第29届国际生物奥林匹亚国手选拔营 植物实作题 注意:操作时间有限,请善用等待实验作用的时间.

一、材料及实验设备: A 实验植物材料:(仅使用野生型 Col-

0、突变体 b) 数量 1. 阿拉伯芥 (野生型 Col-

0、突变体 b)在白光生长

2 周后再移入(红光+蓝光)(光强度

100 ?mol/m2 s)中生长一段时间. 一盘(4 种 幼苗)/人B实验器材: 数量 C 药品溶液: 数量 1. 光学/解剖显微镜 各1台平衡溶液(30 mM KCl,

10 mM MES-KOH,pH 6.15)

10 ml/人2. 电子目镜

1 台 平衡溶液(含10 ?M MeJA)

10 ml/人3. 笔记型电脑

1 台 平衡溶液(含50 ?M ABA)

10 ml/人4. 剪刀/尺/计算机 各1个蒸馏水

10 ml/人5. 滴管 3cc

3 支6. 镊子(细尖头)

2 支7. 载玻片

6 片8. 盖玻片

12 片9. 吸水纸

1 盒10. 单面刀片

1 支11. 油性签字笔(细头)

1 支12. 纸胶带

1 卷13. 雾面胶带

1 卷14. 分隔培养皿(已标考号)

4 盘15. 计时器

1 个 注意事项: 1. 请确认考生编号是否正确;

若有误,请举手请助教处理. 2. 桌上的药品及器材用完后,将不再补充. 3. 公用仪器运用请依照指示使用. 4. 本试卷(含封面、试题卷)共5页,於交卷时全部缴回. 5. 作答时间共

90 分钟,请於本卷上作答.试题答案可写至题目背面,但请 注明并标上题号. 考生编号_分?_

2 第一部分 调查光强度与激素对於阿拉伯芥气孔的影响: 本次实作乃利用白光与红光、蓝光,以及不同激素处理阿拉伯芥(野生型 Col-0, 以及突变体 b)一段时间后,利用显微镜观察叶片下表皮气孔打开的状态,以t解 光和激素对於阿拉伯芥气孔的影响.

二、实验方法、结果与讨论: 实验一:以直接撕叶片表皮方法,进行气孔的观察. 1. 取生长在(红+蓝光)(总光强度是

100 ?mol/m2 s)中的阿拉芥(野生型 Col-0, 以及突变体 b)幼苗叶片各一片,进行气孔大小的观察. 2. 样本制作 请剪下约长 5.5 公分 , 宽2.5 公分的纸胶带黏性面朝上固定於桌面 , 取阿拉芥(野 生型 Col-0 及突变体 b)之叶片,将叶面上表皮平贴至纸胶带上,再以雾面胶带 服贴下表皮,形成三明治的状态(轻压),再小心撕下雾面胶带,植物的下表皮 就会跟著雾面胶带一起被撕下来. 依下面不同的实验处理 , 将野生型以及突变株 b 可以标记在雾面胶带的角落, 以利区别.? 含野生型及突变株下表皮的雾面胶带 (请制作三组)!!! 3. 激素(荷尔蒙)处理 ?请於分隔培养皿中分别滴入平衡液(30 mM KCl,

10 mM MES-KOH,pH6.15) 将3组含野生型及突变株下表皮的雾面胶带分别浸泡在分隔培养皿的平衡溶 液中,维持在原先光强度的植物生长箱反应

15 分钟. ?请依以下 ABC 溶液滴入分隔培养皿中: A. 对照组:平衡液(含30 mM KCl,

10 mM MES-KOH,pH6.15) B. MeJA 组:平衡溶液(含10 ?M MeJA 含甲基化茉莉酸的平衡溶液) C. ABA 组:平衡溶液(含50 ?M ABA 含离层酸的平衡溶液) ?将反应

15 分钟后的野生型及突变株下表皮之胶带,分别移入 ABC 分隔培养皿 内:使下表皮的雾面胶带浸泡在分隔培养皿的溶液中,继续於原来光照条件的 生长箱反应

20 分钟 ?取出含有植物下表皮连同雾面胶带置放玻片上,用微量吸管滴上原本所处理之 ABC 溶液,然后盖上盖玻片. 4. 利用光学显微镜观察各样品气孔的大小,用电子目镜照相纪录并存档.(6 分) 图档及档名皆注明:考号-图片编号.(如: F1-1 表示考号 F1-野生型对照组) 样品 野生型 突变体 b 对照组

1 2

10 ?M MeJA

3 4

50 ?M ABA

5 6

3 5.以光学显微镜测量各处理后的「野生型」样品气孔的大小,分别量长轴(L;

与 保卫细胞长轴平行者)及短轴(S;

与保卫细胞长轴垂直者)的长度,重复量取 三个不同的气孔以得平均值.注: 以40 倍物镜下,目镜测微器的每个刻度为 单位"U";

气孔大小的表示方式为 L x S (U),纪录於表格二. 测量大小气孔请评估至小数点后一位. 结果与讨论: 1. 根鄄斓母餮返钠仔巫创笮,描绘(是指绘图)於下列表格中. (每格

2 分,共12 分) 样品 野生型 突变体 b 对照组

10 ?M MeJA

50 ?M ABA 2. 在各处理之后,野生型样品气孔的大小 (U) (15 分) 光强度 (?mol/m2 s)

100 对照组 平均

10 ?M MeJA 平均

50 ?M ABA 平均

4 3. 承接问题

1 所观察气孔的大小,试推论突变体 b 最有可能属於何种突变体? 突变体 b:3 分)解释:5 分) 突变体 b 对於 MeJA 与ABA 的反应是否与野生型相同?(3 分) (勾选其一) 相同:还是不同: 请解释原因?(5 分) 4. 承接问题 1,如果将对照组的样品(野生型 Col-0,以及突变体 b)移入黑暗中

4 小时后,试比较其气孔大小与问题

1 的气孔的差异.(3 分) (勾选其一) 突变体 b:变大;

变小;

不变 请解释原因?(5 分) 5. 本实验中气孔大小的观察,请说明照射红光处理的原因?(8 分) 原因:

5 第二部分 阿拉伯芥子叶与真叶的形态解剖比较: 比较不同的阿拉伯芥品系(野生型 Col-0,以及突变体 b)上的子叶与真叶是否有差 异,利用光学或解剖显微镜观察其各项特徵,并列出比较表,如下.将子叶与真 叶分别拍照记录,然后将特徵一一列出,除文字描述特徵外,亦可加绘图补充说 明.(自行加入特徵列) (共35 分) 1. 子叶与真叶分别拍照记录.(10 分) 请利用电子目镜照相纪录之并存档,图片中另可加文字说明 请注意:照相图片及存档名皆需为:考号.否则不予计分. 用光学显微镜(4 倍物镜)拍照指出两者的差异 2.比较表 (25 分) 特徵 野生型 突变体 b