PDF《产品特点》

产品简介 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,可从多种动物源 性植物饲料中提取基因组DNA.

离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物.提取的基因组DNA 片段大,纯度高,质量稳定可靠. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR等实验. 产品特点 简单快速:1 h内即可获得超纯的基因组DNA. 广泛:适用于动物源性植物饲料、多种动物细胞和动物组织等. 超纯:获得的DNA纯度高,可直接用于PCR、酶切等分子生物学实验. 注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项. 1.若缓冲液GA或GB中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,并摇匀后使用. 2.所有离心步骤均为室温下离心. 操作步骤 使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签. 1. 处理材料:

50 mg研磨粉碎的动物源性饲料加入320 μl缓冲液GA,振荡至彻底悬浮. 注意:如果需要去除RNA,可加入4 μl RNase A(100 mg/ml)(客户自备,目录号: RT405-12)溶液,振荡15 sec,室温放置5 min. 2. 加入20 μl Proteinase K溶液,混匀.在65℃放置20-30 min,其间混匀样品2-3次. 3. 加入340 μl缓冲液GB,充分颠倒混匀,65℃放置10 min,其间混匀样品2-3次. 注意:如果第

2、3步中65℃温浴期间离心管底出现沉淀,请将沉淀振荡至彻底悬浮后再 进行65℃水浴操作. 4. 12,000 rpm (~13,400*g)离心2 min,取440 μl上清至新管中. 注意:若所取上清中有可见悬浮颗粒,请重复步骤4一次,否则颗粒物质会堵塞吸附柱. 5. 向上清中加入220 μl 无水乙醇,充分颠倒混匀6-8次,此时可能会出现絮状沉淀. 注意:若所取上清体积小于或大于440 μl,则无水乙醇应加到上清体积的1/2.例如:取500 μl上清,加入250 μl 无水乙醇. 6. 将上一步所得溶液和絮状沉淀全部加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中), 12,000 rpm(~13,400*g)离心2 min,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中. 注意:离心时间请不要少于2 min,否则可能会导致吸附柱堵塞,如果离心时出现吸附柱 堵塞情况时,请再次12,000 rpm(~13,400*g)离心2 min. 7. 向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13,400*g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中. Order: 010-59822688 Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057 TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD 本产品仅供科研使用.请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途. 8. 向吸附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13,400*g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中. 9. 重复操作步骤8. 10. 将吸附柱CB3放回收集管中,12,000 rpm(~13,400*g)离心2 min,倒掉废液.将吸附柱 CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液. 注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续 的酶反应(酶切、PCR等)实验. 11. 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓 冲液TE,室温放置2-5 min,12,000 rpm(~13,400*g)离心2 min. 注意:为增加基因组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中,室温放置

2 min,12,000 rpm(~13,400*g )离心2 min.洗脱缓冲液体积不应少于50 μl,体积过 小影响回收效率.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响.若用ddH2O做洗脱液应保证 其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;

且DNA产物应保存在-20℃, 以防DNA降解. DNA浓度及纯度检测 得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关.回收 得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度. DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml 单链DNA. OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏 低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低. 版本号: DP121221 产品内容 产品组成 DP323-02 DP323-03 (50 preps) (200 preps) 缓冲液GA(Buffer GA)

30 ml 2*50 ml 缓冲液GB(Buffer GB)

30 ml 2*50 ml 缓冲液GD(Buffer GD)

13 ml

52 ml 漂洗液PW(Buffer PW)

15 ml

50 ml 洗脱缓冲液TE(Buffer TE)

15 ml

60 ml Proteinase K

1 ml 4*1 ml 吸附柱CB3(Spin Columns CB3) 50个200个 收集管(2 ml)(Collection Tubes

2 ml) 50个200个 选配试剂 RNase A(100 mg/ml)(目录号:RT405-12). 储存条件 该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于 2-8℃.2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时 间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀. TIANamp Feedstuff Animal DNA Kit 动物源性植物饲料 基因组DNA提取试剂盒 (离心柱型) 目录号:DP323