PDF《科学院 武双病》

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1 第J0卷 第 3期 [

9 9 5年 9月 痈宝 l I ]国病毒学Vl R0LoGI CA SI NI CA

6 ,

7 2

6 V01 .

1 0,No.

3 So p., I

99 5 棉铃虫病毒杀虫乳悬剂 的生产及其药效试验 ( 中国科学院武双病毒研究所.武双船o07I)TQ,5s王、7(湖北天 门蒋 潮病 毒杀 虫剂 实验 工厂 . 湖北天 门431725)提要成功研 制 出棉 铃 虫病 毒(NP V) 杀虫 乳 悬剂 , 改进 r生产下艺 和设 备,建立r棉 铃虫 的室 内品系.提高了生 产 效率 , 建立丁产 品的检 测方法,提高 r产品质量 , 促使棉铃虫病 毒杀虫剂 商品开发获 得成 功 .太 田试 验证 明,病毒乳 悬剂 的防 治效 果,相当于 当前 推广的化学 农药 . 优于原病毒可 湿性 粉剂 相 同剂 量(0.53--1.07X10 Pm顷) 的 病毒 乳悬剂 可使 虫 口平 均减 退91.7,而病 毒 可湿性 粉剂 为83.7~关键词 棉铃虫,NP V 乳 悬剂 生 产工 艺.毒由检测 , 防治效 果――――一―――一一渤潞棉铃 虫(I1eliothis叩)是一种世界性 大害虫,也是我国农业上危害最严重的害虫当前由于该类 害虫对化 学农药 产生了非常严重的抗性 . 单纯 依靠 化学 农药 已很难控 制 其发生 和危 害. 因此 , 开展 生防技术的研究具有很重要的现实意义 . 利用核型多 角体病毒 ( NP V) 防治棉铃 虫,不仅安全可靠 , 杀虫效 果好[ : , 而且 不会导致害虫产 生抗性 口].因此 , 棉铃 虫病 毒杀 虫剂是 一种比较 理 想的 生物 杀虫剂.由于病毒 目前还 只能 在活细胞 内增殖 , 当前大 量生 产昆虫 病毒的方法 , 还 只能是用宿 主昆 虫来生产 .I g n o f f o (

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6 5 ) [ 首先在美洲 棉铃虫 ( 打e l g o l h i . d ) 核型 多角体病 毒 的生产方 面 获得 了突破性进展 , 建立 了用半合成人工饲料饲养 棉铃虫大批 量增殖病毒的方法 . 为 了保持病 毒的 活性 , 提高 使用的稳 定性 , 在病 毒中加入一些辅 剂,制备成 一定的剂型 [ . 一, 从而 提高了 防 治效 果 .七 十年代,由在 美国的Sandoz公司实现了小规模机械化生产[B]于1975年取得临时登记注册 , 商 品名称 El c a r , 是一种可湿性 粉荆 , 但商业 匕 并未开 发成功 世界 匕第一 个病 毒杀 虫剂―― 美洲棉铃虫病毒 杀虫剂的研 究成功 , 推动 了我 国棉铃 虫病 毒杀虫剂的研究 : . 成功地 建赢 了具 肓我国特 色的大 批量饲养棉 铃虫 增殖病毒的技术 l

9 8 5年,在湖北 省天 门蒋湖农 场,创建 了我 国第一 座棉铃虫病毒杀虫剂中试生产车间 , 小批量 半机 械化 生产 ] 中试 样品也 是一 种类 似于 E l c a r的可湿性 粉荆,于1994年 获得 临时登记 注册 , 商 品名称 棉烟 灵 可 湿性 车文 于1995年

1 5日收到.3H

1 7日修 回 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 3期 张 光裕 等:棉钟虫病 毒 杀虫 乳悬 剂 的生 产 及其 药效 试验24

3 粉剂 为了克服 可湿性 粉剂的缺点 , 我们叉成 功地 研制 出新剂型――病毒乳悬剂 . 该剂 型加工 简便 , 杀虫效果 好,稳定性好 , 有利于商 品开 发.在 生产工艺和设备方面都 有比较大的改进 . 大 田试验证 明,病毒乳悬 剂对 棉花棉铃虫具有 良好的 防治 效果 , 相 当于 当前 推广 的化学 农药 , 优于病毒可湿性粉荆,现已大 批量生产方法与结 果l病毒乳悬剂的生 产1.1棉铃 虫室内品系的建赢和饲养从1986年 , 我们就开 始建 棉铃虫的室 内品 系( C o l o n y ) , 每代从幼虫 、 蛹和成虫进 行择优 选育 . 到I994年 , 已传 了1O0多代 室 内品 系的显著特 点:虫体 大,产卵 多,病毒产 量高 , 不外逃,适宜人工 饲料饲养,适宜工厂化生 产将配制好的半流质 人工饲料 , 趁热(加. ~8

0 ) 用改进 型(MS I b

0 2 A 型) 饲料分装机 定量 分装到塑料分格 养虫盘 .一个养虫盘包含

1 2 0个饲 养小杯 , 每 个小杯装 人工饲 料4~5 g .两人操作 . 一台改进 型饲 料分装机每小时可分 装t00盘 , 较原机 型提 高工效

3 0 棉铃 虫的羽化产 卵在特制 的羽化 产卵箱口 : 内进行 一般一头 雌蛾可 产卵

6 0

0 ~

8 0 0粒,较以前口:提高30~柏将带卵的 纸帕消毒后覆盖在装有人工 饲料的养虫盘上,集装堆放在饲养室内保持室内温 度25~30.C, 相对湿度50~60由卵孵 化成幼虫经过l3~i4天 成为蛹,化蛹率

8 0 ~

8 6 , 蛹重350~370mg, 较 以前 口提高4~7rag .

1 .

2 病毒的增殖与 加工 供 生产 甩的病 毒株 , 选 用中国科学 院武汉病毒研 究所分离 的 中国 棉铃虫 单核 衣壳型 多角体病毒 Ha S NP V― W 株.四株棉铃虫 NP V 比较试验 [

9 _ 证明,Ha S NP V― W 株的 L D5

0 值(36JPIB/ 8饲料) 和LTs0值(.6天 ) 与 美国 棉铃 虫单 核衣壳 型多 角体病 毒H~NP V 相当, 优于 国 内分 离的另两株多核衣壳型病毒Ha MNP V, L D5 o 相差6.8~9 . 8倍,LT50值缩短1.5~2天待幼虫发育到 四龄接种病毒,感染浓度5*【06PIB/ ml , 饲 料表 面 喷雾 接种6天 后开始收 集病 死幼虫 .感 染死亡率

7 0 ~8

0 , 单虫 病毒 产量

3 0 ~1

2 0亿PIB, 每个饲 养盘可 生产

7 .

2 x

1 0 P I B, 每 个饲 养杯 平均

6 0亿PIB, 比80年代末和

9 0年代初产量提高 1倍 每盘生产成本仅

1 .

1 元,比原成 本F降】.5倍 . 虽然从病 毒致 死幼虫所获得的病毒 比感 染病毒 尚未死 亡的幼虫提取 病毒所 含细菌污染的 数 目要多

5 0 ~7 5倍,但前者 病毒活性 比后者大 』 ~7倍,单虫多 角体病毒 产量也 比后 者高 ] 将收集的病 毒虫 尸研 磨、过滤、离心除杂,获粗 提纯 的多角包 涵体(PI B ) . 用血 球计数器计数,稀释成

6 *1

0 P I B/ ml , 加乳化 剂,保护荆和增效 剂等辅 荆,借以提 高病 毒的稳 定性 和杀 虫效果.最后的产品是一种均一灰乳白色格带粘性的液体.每毫升含30亿 P I B, 比重I.05,pH6.5,具良好 的乳化性能,悬浮性能和扩散性能.1.3产品毒 力检 测 采用生物糟性测 定方法 _ l

1 : , 对产品毒力进行检测 选用四天 虫龄 幼虫 ( 体重 l

5 士3 .

5 mg ) 供生测用.将 样品稀释 成I:【 *

1 0 ;

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3 .

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I :1 *

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】:1 * 五种浓维普资讯 http://www.cqvip.com

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4 中国病毒学第10卷 度,另设 空白对照组 .每个养虫瓶放 人工饲料 l g , 加入待测 样品稀释 液50tJl每瓶移入供试幼 虫一 头,每组

6 0头,置27.土0 .

5 ~ C.每天检查感染死亡数 .重 复三次 .按常规数 理统 计方法计 算LD5 o 值为

0 .

0 0

0 1

5 ~

1 ( 含450PIZB).毒力( 生物活性或效价 ) 单位6666Ha U儿I ( 使宿 主幼虫死 亡50%........