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49 ? L Renilla Luciferase Assay Buffer 中,此稀释方法可按比例相应扩大. 注:1* Coelenterazine 工作液应该现用现配. 3. 化学发光值检测 3.1 将上述配制好的萤火虫荧光素检测液和1*Coelenterazine 工作液恢复至室温. 3.2 按仪器操作说明书开启化学发光仪或具有检测化学发 光功能的多功能酶标仪, 将测定间隔设为

2 秒, 测定时间设 为10 秒. 3.3 每个样品测定时, 取样品 20-100 微升(如果样品量足够, 请加入

100 微升;

如果样品量不足可以适当减少用量,但同 批样品的使用量宜保持一致). 3.4 加入

100 微升萤火虫萤光素酶检测试剂,用枪打匀或 用其它适当方式混匀后测定 RLU(relative light unit). 以报告 基因细胞裂解液为空白对照. 3.5 在完成上述测定萤火虫萤光素酶步骤后,加入

100 微升 海肾萤光素酶检测工作液, 用枪打匀或用其它适当方式混匀 后测定 RLU(relative light unit). 3.6 在以海肾萤光素酶为内参的情况下,用萤火虫萤光素酶 测定得到的 RLU 值除以海肾萤光素酶测定得到的 RLU 值. 根据得到的比值来比较不同样品间目的报告基因的激活程 度.如果以萤火虫萤光素酶为内参,也可以进行类似计算. 注意事项 1. 为取得最佳测定效果,在用单管的化学发光仪测定时, 样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制一致;

使 用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时, 宜先把样 品全部加好,然后统一加入萤火虫萤光素酶检测试剂. 2. 由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需 达到室温后再进行测定 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作. 相关产品 产品货号 产品名称 F6024-50T Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶 报告基因检测试剂盒) F6024-200T F6024-1000T R6073-50T Renilla Luciferase Assay Kit(海肾萤光素酶报 告基因检测试剂盒) R6073-200T R6073-1000T S6072-100T One-Step Firefly Luciferase Assay Kit S6072-500T S6072-1000T