PDF《桑卷叶枯病病原菌的形态特征与分离培养条件》

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2012 年第

4 期 总第

123 期 桑卷叶枯病是桑树的主要真菌病害之 一, 该病在我国大部分蚕区如江苏、 浙江、 湖南、 湖北、 四川、 重庆等省(市)均有发生.

桑树 发病后, 桑叶上形成黄褐色大病斑, 并向背面 卷缩, 随后干枯变黑脱落.近几年来, 该病在 湖南省桑园常有发生, 局部地区造成流行, 有 的桑园内株发病率高达 50%, 桑叶产量损失 严重. 该病病原菌为半知菌亚门的桑单胞枝霉 菌( Yendo), 以菌丝体在病 叶组织中越冬,每年发病时期为 4~10 月[1] . 为了解桑卷叶枯病的发生规律,并有效控制 其发生与流行,本课题组对桑卷叶枯病病原 菌的生物学特性开展了研究,本文报道病原 菌的形态观察与分离培养实验结果.

1 材料与方法 1.1 病原菌的分离与培养 采用组织分离法和稀释纯化法,直接从 桑卷叶枯病病叶(图1)组织中分离病原菌桑 单胞枝霉菌 ( Yendo), 在PDA 培养基(马铃薯

200 g, 葡萄糖 10~20 g, 琼脂 17~20 g, 水l000mL)上培养, 并经柯赫 氏法则验证得到 HM1 菌株[2] . 桑卷叶枯病病原菌的形态特征与分离培养条件 谈顺友 李章宝 王明黄仁志 何行健 刘昌文 (湖南省蚕桑科学研究所, 长沙 410127) 摘 要院桑卷叶枯病是桑树的主要真菌病害之一.采用常规的微生物学试验方法观察病原菌桑 单胞枝霉菌 Yendo)的形态并研究病原菌的分离培养条件.结果表明, 病原 菌在 PDA 培养基上生长良好, 形成白色圆形凸状菌落, 并能产生大量的暗蓝褐色分生孢子梗和 淡灰色分生孢子;

菌丝的生长温度为 8~40℃, 产生分生孢子的温度为 10~38℃, 分生孢子的致 死温度为 50~55℃, 菌丝生长和分生孢子产生的最适温度为 25~30℃;

适合菌丝生长的 pH 为4.5~11.0, 最适 pH 为6~7: 相对湿度大有利于菌丝生长和分生孢子的产生与萌发: 连续光照 可促进产孢.以上结果信息可供研究桑卷叶枯病病原菌的危害特点和建立病害的有效防治方 法参考. 关键词: 桑卷叶枯病;

桑单胞枝霉菌;

形态;

培养基;

温度;

湿度;

pH 值 资助项目院湖南省科技厅科技计划项目(No.2008NK3083)袁现代农业产业技术体系专项(No.CARS原22)遥 第一作者信息院谈顺友(1962-)袁男袁高级农艺师遥 E-mail院[email protected] 通信作者信息院李章宝袁副研究员遥 E-mail院[email protected] 图1桑卷叶枯病病叶症状

1 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 www.fineprint.cn 蚕丝科技

2012 年第

4 期 总第

123 期1.2 病原菌的形态观察 在培养皿中倒入

10 mL PDA 培养基, 接种HM1 菌株后置于 28℃恒温箱中培养, 观察 菌落形态, 测量菌落直径大小;

在显微镜下观 察菌丝分生孢子梗分生孢子的形态和颜色, 采用测微尺测量其大小

3 个重复,每个重复 测量

3 次, 计算平均值[3] . 1.3 病原菌的分离培养试验 1.3.1 温度对菌丝生长产孢和孢子萌发的影 响 试验采用 PDA 培养基, 接种菌丝体后的 培养皿分别置于 8~40℃的梯度温度条件下 培养, 1d 后测量菌落直径, 4d 后用培养皿计 数方法测算产孢量,取分生孢子悬浮液 5ml 倒入培养皿中,置于各种温度环境中, 2d 后 在显微镜下随机调查

300 个分生孢子的发芽 情况, 每个处理设

3 个重复[3-4] . 1.3.2 湿度对菌丝生长产孢和孢子萌发的影 响 试验在 PDA 培养基表面有水滴、湿润、 干燥的条件下, 接种菌丝体后放入 28℃恒温 箱中培养, 观察菌丝生长、 产孢和孢子萌发情 况, 每个处理设