PDF《桑卷叶枯病病原菌的形态特征与分离培养条件》

3 个重复[3~4] . 1.3.3 光照对菌丝生长和产孢的影响试验 采用PDA 培养基, 光源为普通日光灯, 设连续光 照、

12 h 光照与黑暗交替、连续黑暗

3 种处理, 用菌丝片接种后, 置于 28℃下培养, 观察菌 丝生长和产孢情况, 每个处理重复

3 次[3-4] . 1.3.4 pH 对菌丝生长和产孢的影响试验 采用PDA 培养基,灭菌后用 2mol/L HCl 溶液 和2mol/L NaOH 溶液将 pH 调到 4.5~11.0 范围, 使pH 值呈梯度变化.每个培养皿中倒 入10 mL 培养基,用直径 6mm 的菌丝片接 种,置于 28℃恒温下培养, 2d 后测量菌落直 径, 4d 后测算产孢量, 每个处理重复

3 次[3] . 1.3.5 分生孢子致死温度的测定 配制适当 浓度的孢子悬浮液,

3 支试管各加 2mL 孢子 悬浮液,再分别置于

45、

50、

55、 60℃的恒温 水浴锅中,

10 min 后取出试管, 用灭菌吸管吸 取悬浮液滴在凹玻片上,保湿于 28℃下,

2 d 后检查孢子萌发情况, 每个处理重复

3 次[2] .

2 结果与分析 2.1 桑单胞枝霉菌 HM1 菌株的形态特征 桑卷叶枯病病原菌 HM1 菌株在 28℃下于 PDA 培养基上生长良好,

24 h 能形成直径

8 mm 的白色圆形凸状菌落,

48 h 后菌落分

3 层 (图 2): 底层直径 22mm, 为白色菌丝体, 中层 直径

16 mm, 为浅灰色分生孢子梗;

上层直径

10 mm, 为蓝褐色分生孢子. 菌丝无色透明, 粗 细不等, 直径为 2.8~5.1μm.分生孢子梗蓝 褐色,丛生成簇,具多个隔膜,大小 240~ 296μm*5.9~7.4μm. 分生孢子椭圆形或柠 檬形, 淡灰色, 单胞, 大小 7.4~8.5μm*5.5~ 6.6μm. 2.2 桑单胞枝霉菌 HMl 菌株的培养条件 2.2.1 温度对菌丝生长尧产孢和孢子发芽的影 响HM1 菌株的菌丝生长温度范围为 8~ 40℃, 最适温度为 25~30℃, 产生分生孢子的 温度为 10~38℃, 最适温度为 28℃. 菌株的分 生孢子在 15℃时发芽率为 12.0%, 25~30℃ 时发芽率 95.0%~93.0%,达最高峰, 35℃发 芽率 18.0%, 40℃不发芽.分生孢子发芽温度 为15~35℃, 最适温度为 25~30℃(表1). 2.2.2 湿度对菌丝生长尧产孢和孢子发芽的影 响28℃环境中, HM1 菌株在 PDA 培养基表 面有水滴的情况下菌丝生长最快,

24 h 形成 直径

12 mm 的菌落, 36h 能产生分生孢子;

在图2桑单胞枝霉菌 HM1 菌株的菌落形态

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2012 年第

4 期 总第

123 期表1桑单胞枝霉菌 HMl 菌株在不同培养温度下的 菌丝生长和产孢及孢子发芽情况 表2桑单胞枝霉菌 HM1 菌株在不同 pH 值下的 菌丝生长和产孢情况 湿润的 PDA 培养基上培养 24h 后菌落直径

9 mm, 40h 产生分生孢子:在干燥的 PDA 培养 基上菌丝生长极慢, 不能产生分生孢子. 有水 滴的情况下孢子萌发快, 而干燥的条件下, 孢 子不能萌发. 说明相对湿度越大, 菌丝生长和 产孢速度越快, 孢子萌发也快. 2.2.3 光照对菌丝生长和产孢的影响

3 种 光照处理 HM1 菌株的菌落直径无显著差异, 连 续光照产生的分生孢子量比连续黑暗多,说明 光照对菌丝的生长影响不大, 但可以促进产孢. 2.2.4 pH 对菌丝生长和产孢的影响 HM1 菌 株在初始 pH 为4.5~11.0 的PDA 培养基上 菌丝能生长和产孢,初始 pH 为6.0~7.0 时, 菌丝生长最佳, 初始 pH 为8.0~9.0 时, 菌丝 产孢量最多(表2) 2.2.5 分生孢子的致死温度 HM1 菌株的分 生孢子在水温

60、 55℃下处理

10 min 后, 孢 子不能萌发;