PDF《第21 卷1期》

第21 卷1期中国病毒学21(1) :57-63

2006 年1月VIROLOGICA SINICA January

2006 收稿日期:2005-06-28,修回日期:2005-08-09 作者简介:胡兆丽(1979-) ,女,江苏省籍,硕士生,从事昆虫病毒分子生物学研究.

* 基金项目:苏州大学

211 工程 基金项目(XB114060) ** 通讯作者:朱江(1945-) ,男,江苏省籍,教授,从事昆虫病毒分子生物学研究. Corresponding author. Tel: 0512-65880278. E-mail: [email protected] SpltMNPV 日本分离株 gp41 的克隆表达及 gp41 和ph 的进化分析* 胡兆丽

1 ,朱江1** ,盛晔1,王文兵

2 ,李新平

1 ,沈颂东

1 (苏州大学生命科学学院, 江苏苏州 215123;

2. 江苏大学生命科学学院, 江苏镇江 212013) Cloning and Expression of the gp41 Gene from SpltMNPV Japan Strain and Analysis of Phylogeny Based on gp41 and ph gene HU Zhao-li1 ,ZHU Jiang1** ,SHENG Ye1 ,WANG Wen-bing2 ,LI Xin-ping,SHEN Song-dong1 (1. Life Sciences School, Suzhou University, Suzhou, 215006, China;

2. Institute of Life Sciences, Jiangsu University, Zhenjiang, 212013, China) Abstract: The gp41 gene was cloned from Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus (SpltMNPV) Japan-C3 strain. This gene is 993bp long and encodes a polypeptide with a predicted molecular mass of 36.9 kDa. Analysis showed the gp41of SpltMNPV Japan-C3 strain was most closely related to that of SpltMNPV Chinese-G2 strain with 99.9% identity in nucleotide sequence and 99.9% in amino acid sequence. The phylogenetic trees based on gp4l and polyhedrin had the similar topologies. The combined tree of gp41 and polyhedrin had an identical topology as the gp41 gene. Mutation rate analysis showed the gp41 gene had a higher nucleotide substitution rate than that of the polyhedrin gene, implying that the polyhedrin gene may have a different selection constraint than the gp41 gene. Key words: Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus;

gp41;

Phylogeny 摘要: 从斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus, SpltMNPV) 日本分离株(C3) 基因组中克隆了 gp41 基因.该基因编码区含 993bp 核苷酸,编码分子量为 36.9kDa 的多肽.将该基因克隆至原 核表达载体 pET28a,经IPTG 诱导后在大肠杆菌 BL21(DE3)中获得了表达.应用 CLUSTAL 程序分析表明, SpltMNPV日本株(C3) gp41的核苷酸序列和氨基酸序列与SpltMNPV中国G2株相似性最高, 均达99.9%. 用MEGA 分别构建了基于 gp41 和ph 的聚类分析图和分子进化树,发现它们具有相似的拓扑结构.将这两个基因序列结合 在一起构建进化树,该树的结构与基于 gp41 的进化树相似.突变率分析显示 gp41 的突变率高于 ph,这意味着在 杆状病毒进化过程中,gp41 和ph 面临不同的选择压力. 关键词:斜纹夜蛾;

核型多角体病毒;

gp41;

系统发育;

基因表达 中图分类号:S43 文献标识码:A 文章编号:1003-5153(2006)01-0057-07 斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus, SpltMNPV) 属于杆状病毒科, 其宿主昆虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura, Spli)是一 种多食性害虫, 已知可危害的寄生植物达

99 科290 多种,该虫严重危害农作物以及蔬菜、花卉,近年 来对草坪的危害特别严重[1] .杆状病毒作为一种生 物杀虫剂在全世界已经被广泛采用,它可以引起许 多昆虫的感染, 在害虫的生物防治中有重要作用[1] , 而作为一种重要的真核蛋白表达系统,它也得到 了广泛的应用[2~4] .但是昆虫杆状病毒的宿主专一 性较强,杀虫谱较窄以及对老龄幼虫的低毒性等 缺点有待解决.寻找和筛选新的高毒力的病毒杀