编辑: gracecats 2015-01-17
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1 号楼三层 301-67 号DAB 显色液(双组分金属增强,即用型) 产品编号:1005 DAB (3,3'-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride)显色液用于HRP标记的免疫印迹和 免疫组化实验, 产生棕色的产物易于观察, 不受乙醇影响, 可以用含有乙醇的溶液进行复染. DAB产生的颜色可通过向反应体系中加入金属例如镍、铜、银和钴来增强,它们在辣根过 氧化物酶-过氧化氢底物反应中形成更加致密的复合物. 规格 本产品包装规格为10ml、20ml、50ml、100ml 运输、储存和有效期 冷藏运输, 2-8° C 储存,在有效期内使用. 正常储存条件下自生产之日起有效期

1 年 操作方法 1. 加等量的 A 液和 B 液至印迹膜或组织片上,完全覆盖反应表面 2. 孵育 5~30 分钟,注意观察,避免过度染色 3. 用蒸馏水中漂洗 2~3 次4. 将膜干燥后,拍照 5. 组织片进行复染 可能出现的问题及解决办法 背景过高: 1. 加一抗之前,用10%的正常血清(与二抗来源同种动物)的血清封闭;

2. 加一抗之前, 加内源性过氧化物酶抑制剂处理组织;

3. 减少染色时间;

4. 减少结合物的 浓度 不显色或显色过浅: 1. 调整一抗的浓度;

2.调整二抗的浓度;

3. 确认酶标抗体是否有活 性;

4.考虑使用生物素-亲和素放大系统;

5.延长染色时间;

6.确定是否在加一抗前需要对 抗原进行酶处理以暴露抗原 其它:正常情况下,颜色呈蓝色或蓝黑色,若为红棕色,可能金属沉淀不均匀,将A液摇匀,再滴加 注意事项 DAB 有一定的致癌性,避免污染环境,废弃物或污染部位可用 2%次氯酸钠溶液浸泡 参考文献: Adams, J.C. (1977). Neuroscience2, 141-145. Adams, J.C. (1981). J. Histochem. Cytochem.29, 775. Geoghegan, W.D. and Ackerman, G.A. (1977). J. Histochem. Cytochem.25, 1187-1200. Graham, R.C. and Karnovsky, M.J. (1966). J. Histochem. Cytochem.14, 291-302. Rodbard, D. (1978). Anal. Biochem.90, 1-12. 包装规格(ml) Sol A Sol B

10 5

5 20

10 10

50 25

25 100

50 50

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