PDF《标准操作程序》

(六)质量控制 检测过程对可能出现的假阳性和假阴性进行质量控制, 除了检测商品试剂盒所提供阳性和阴性对照外,每次临床样 本检测时,至少应当有

1 份弱阳性和

3 份阴性质控样本(多 份阴性质控样本设置对实验室 污染 所致假阳性的监控更 为有效),随机放在所检测标本的中间.弱阳性质控样本可 为检测阳性的灭活稀释后保存的临床样本、灭活病毒或假病 毒颗粒等, 如所采用的商品化试剂盒有 内标 控制假阴性, 或弱阳性质控样本来源困难,可暂不设弱阳性质控.阴性质 控样本采用标本采集管内溶液即可.质控样本应与临床标本 同等对待,参与样本核酸提取和扩增检测全过程. 试剂盒中的阳性和阴性对照用于判断实验室的有效性, 按试剂盒说明书进行.

(七)实验结果的判定与解释. 按照试剂盒说明书进行.对于出现弱阳性结果的样本应 进行重复检测,并注意与可能的实验室轻度或样本交叉 污染 所致假阳性结果区别.

五、检测结果报告 按照试剂盒说明书进行.

六、其它注意事项

(一)人感染 H7N9 禽流感病毒实验室活动、样本采集 和运输按照《人间传染的病原微生物名录》中高致病性禽流 感病毒进行管理.从事人感染禽流感检测的技术人员必须经 过生物安全培训并具备相应的实验技能,在检测过程中必须 采取生物安全防护措施(使用眼罩、N95 型口罩等).样本 核酸提取必须在Ⅱ级生物安全实验室,经过年检合格的二级 生物安全柜内进行.实验室应具有良好的通风.

(二)注意仪器设备的日常和定期维护,加样器、扩增 仪和温育设备应进行定期校准.试剂盒及一次性使用的无 DNA 酶和 RNA 酶PCR 反应管、离心管、带滤芯吸头等应进行 每批质检.

(三)实验应严格分区操作;

各区物品、工作服等均应 当专区专用,不得交叉使用.实验后应及时清洁工作台,以 防污染.

(四)每批实验室后,可采取实验室通风、10%次氯酸 钠溶液擦洗地台面、紫外照射等措施,消除可能存在的扩增 产物气溶胶污染.

(五)使用中国疾控中心制备试剂开展检测工作时,可 参考相应试剂盒说明书(见附件

1、2)有关要求. 附件:1.H7N9 亚型禽流感病毒 RNA 检测试剂盒(荧光 PCR 法)说明书 2.H7N9 禽流感病毒核酸检测试剂盒 (PCR-荧光探 针法)说明书 H7N9 亚型禽流感病毒 RNA 检测试剂盒 (荧光 PCR 法)说明书 【产品名称】 通用名称:H7N9 亚型禽流感病毒 RNA 检测试剂盒(荧光 PCR 法) 英文名称:Diagnostic Kit for H7N9 subtype avian flu virus RNA(Fluorescence PCR) 【包装规格】48 人份/盒. 【预期用途】 本试剂用于对咽拭子样本中 H7N9 亚型禽流感病毒 RNA 进行定性检测,用于 H7N9 禽流感病毒感染的辅助诊断及流 行病学监控. 【检验原理】根据荧光 PCR 技术原理,针对 H7N9 亚型 禽流感病毒的 HA 基因和 NA 基因设计特异性引物和 Taqman 探针,通过荧光 PCR 检测仪进行检测,从而实现对 H7N9 亚 型禽流感病毒 RNA 的定性检测.试剂盒以正常人上皮细胞中 广泛存在的核糖核酸酶 P(RNase P)的mRNA 为正常人体细 胞对照,对提取和检测过程进行监控. 【主要组成成分】 名称 成分 规格 数量 (管) H7 反应液 含内标 RNP 、H7 亚型特异基因的引物探针混合液 1.0ml/管1N9 反应液 含内标 RNP 、N9 亚型特异基因的引物探针混合液 1.0ml/管1DNA 聚合酶 DNA 聚合酶,不可用其他同类 DNA 聚合酶替代 60μl /管1逆转录酶 逆转录酶,不可用其他同类逆转录酶替代 60μl /管1阳性对照 RNP、H