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厦门太阳马生物工程有限公司 梭华- Sofast? 体内转染操作规程 Tel:0592-6535

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com http://www.sunmabio.com 1. 产品简介 梭华-Sofast? 为最新一代阳离子聚合物转染试剂, 适用于体外细胞转染和动物体内转染. 梭华- Sofast? 转染效率高,毒性低,不被血清清除,转染程序简单,使用安全,与病毒和脂质体 相比,应用于体内转染有更大的优势. 2. 产品储存 5.0mg/ml.梭华- Sofast ? 在室温下运输,试剂到达时请即存放于+4℃处,在+4℃可存放一 年.使用前请轻轻摇匀. 3. 转染操作(以注射鼠尾静脉为例) 3.1 50ug DNA 质粒稀释于 200ul 5% 葡萄糖溶液,轻轻混匀;

3.2 7.5ul 梭华- Sofast? 稀释于 200ul 5% 葡萄糖溶液, 轻轻混匀;

3.3 把200ul 梭华- Sofast? 稀释液滴加到 200ulDNA 质粒稀释液中,一边滴加一边混匀;

注意:两种溶液的混合顺序对转染效果非常重要,切勿颠倒滴加顺序. 3.4 混合物在室温孵育

15 分钟;

3.5 注射动物 3.6 在合适的时间内监控基因转染表达.基因转运和表达需要 12-48 小时. 体内转染梭华-Sofast? 和DNA 推荐用量 动物 注射部位 DNA 用量 (ug) 梭华-Sofast? 用量(ul) 最大注射量(ul) 成鼠尾静脉

50 7-8 200-400 门静脉

50 7-8

1000 脑腔 2.5 0.2-0.3

5 心脏

50 7-8

200 皮下瘤

10 1.2-1.8

100 新生鼠 脑腔

1 0.1-0.15

2 4. 问题与解决方法 问题 建议 转染水平太低 1. 优化 DNA 质粒数量 2. 使用高质量的质粒:不能含有 RNA(OD260/280>1.8) 3. 优化梭华- Sofast? /DNA 比例:从1ul 梭华- Sofast? /10ug DNA 至2ul 梭华- Sofast? /10ug DNA 毒性太大 4. 减少 DNA 质粒数量 5. 保证梭华- Sofast? /DNA 比例恒定 6. 保证质粒不含有内毒素 梭华-Sofast? in vivo 操作规程(体内转染) Sunma