编辑: ACcyL | 2015-04-06 |
com 本产品仅作科研用途! 第1页,共1页HB190306 2*Hieff? Robust PCR Master Mix (With Dye) 产品信息 产品名称 产品编号 规格 2*Hieff? Robust PCR Master Mix (With Dye) 10106ES03
1 mL 2*Hieff? Robust PCR Master Mix (With Dye) 10106ES08 5*1 mL 产品描述 2*Hieff? Robust PCR Master Mix (With Dye)选用改造的 Taq DNA Polymerase,添加强力延伸因子、扩 增增强因子以及优化的缓冲体系,扩增速度和扩增产量较普通 PCR Mix 有了质的飞跃.扩增速度可达
15 sec/kb,适用于快速 PCR 反应,1 kb 以内的极限扩增速度可达
5 sec/kb,大幅节省 PCR 反应时间.预混液 中含有 dNTP、Mg2+ ,使用时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤.Mix 中含有 电泳指示染料,可在反应结束后直接进行电泳,使用方便.体系中加入的保护剂使得 Master Mix 经过反 复冻融后仍可保持稳定的活性.PCR 产物的 3'端带 A,可轻松克隆至 T 载体. PCR 反应体系和扩增条件(推荐冰上配制) 扩增体系(50 μL) 扩增条件 组分 体积 循环步骤 温度(℃) 时间 循环数 模板 DNA 适量 预变性
94 3-5 min
1 Primer 正向 (10 μM) 2.5 μL 变性
94 10 sec Primer 反向 (10 μM) 2.5 μL 退火
55 20 sec 30-35 2*Hieff? Robust PCR Master Mix
25 μL 延伸
72 15-30 sec/kb ddH2O to
50 μL 终延伸
72 5 min
1 【注】 :使用前请务必将其彻底混匀. a)模板使用量:人基因组 DNA:30-100 ng;
大肠杆菌基因组 DNA:10-100 ng;
λDNA:0.5-5 ng;
质粒 DNA:0.1-10 ng. b)Mg2+ 浓度:本产品中含有
3 mM 的MgCl2,适合大部分 PCR 反应. c)退火温度:请参考引物的理论 Tm 值,退火温度可设置低于引物理论值 1-2℃. d)延伸速度:长度
1 kb 以内的基因可选择 5-15 sec/kb. 运输与保存方法 冰袋运输.-20℃保存,有效期
2 年. 注意事项 1)PCR 反应体系需在冰上配制,体系混匀后快速置于 PCR 仪进行反应. 2)本产品 PCR 产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳. 3)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作.