PDF《朱振 主》

7 ∥ ) ( 5) 第15卷第

3 期2000年 9月中国病毒学VI ROL OGI CA S I N I C A .

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3 S e p.

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0 0 , . E B病毒4种 反 义寡 核 苷酸 片 段对 一 鼻咽癌 S U N E .

1 细胞株的影响 / 、 , , 』 朱振 主,周元平 , 张清秀 , 高国全 , 邓诣群 , 马涧泉 ― ― ― 一― ― ― ― 一'

(中山医科 大学 生 物化学 教 研室 . 广州510089) ( 中 山医科 大学 附 属三 院传 染科 . 广州510630) 摘要 : 用不 同浓 度的EB病毒4种 ( B H RF I 、 DNA酶、桉抗原.1及 啊苷激酶)反义寡核苷醴片段,(antisenseoligodeoxyma de o t i d e .A S O) 分 别与 古10%胎 牛血 清 或不 含胎 牛血 清的人低 分化鼻咽 唐细胞株 ( S O NE-

1 ) 共 同培 养48h结果 仅适当浓 度的BHRF I . A S ( 3能 引起 无血 清培养的SUN E- I细 胞株 增殖 明显受 抑翻.透射电镜 及 琼脂 糖凝胶电泳检测结果发现与SUNE . I细胞发生凋亡有关;

而相 同浓 度的DNA酶、核抗原 1和 胸苷 激 酶基 因的AS(3则无 类似 作用.荚蕾 调:EB病毒;

反义寡 核 苷醴 ;

细胞 凋亡 中 围分 类号:R373.9文献 标 识码 : A 文章 编号:1003―5

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5 %以上 的低 分化鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma .NP C) 细胞中有EB病 毒(Epstein-Barrvirus.E B v) 基因组存在…,本室曾已报 道在人低分化鼻咽癌 细胞株(SUNE.

1 ) DNA 中可扩增出EB病毒(BHR F

1 、 DN A 酶、核抗原.1及 胸苷激酶)4种 全基因片段l2】,但其对于宿主SLrNE - 1细胞 增殖的影响尚未见报道.已有文献报道EBV的核抗原1(nuclearantigen-1,EBNA1 ) 基 因的反义 寡核苷 酸 片段 ( a n t i s e n s e o l i g o d e o x y n u c l e o t i d e ,AS O) 可抑 制EBV对B淋 巴细胞 的转 化及增 殖_3】.细胞 凋亡( a p o p t o s i s ) 受抑制可 能是肿 瘤 发生 、 发展的重 要原 因, 而促进肿瘤 细 胞的凋亡 已成 为治疗肿 瘤的重要 手段 之一… . 已证 实Bcl-2蛋 白质 具 有拮 抗 多种 因素引起 细胞 凋亡 】 .E B V - B H R F I 基 因产物与 B c

1 .

2 有38%同源性 _

6 】 . 而EBV-DNA酶及 胸苷 激酶( t h y mi d i n e k i n a s e . TK) 则是EBV复制等 所必需的】.本 研究分别用不同浓度EBV- B HRF

1 、 DN A 酶、EBNA- 1及TK基因的 AS O来影响SUNE. 1增殖.初步 探讨该4种 基 因在 NP C中的作用 .

1 材料与方法1.1材料

1 .

1 .

1 细胞 株 人低 分化鼻咽癌 细 胞株 ( S UNE - I ) . 由本校 肿 瘤研 究所提 供.1.1.2EBV的4种 反义寡核 苷醴 片段 ( 均为20b p ) , 由本 室根 据EBV的172.282b p全基因序 列…设计.由基 因公 司合成.其 序 列如 下:收穑 日期 :

1 9

9 8―0 3―1

6 . 修回日期 {

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0 基金 项目: 广东省科 委青 年 基金 (

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华南 生物 中心 厦广 京省 卫生 厅资 助 课题 作者 简舟 : 朱 振宇 (

1 9

6 6年一) . 男, 医学 博士 . 教授 . 主要 研究EB病 毒厦 鼻嚼 癌的 分子 生物 学 维普资讯 http://www.cqvip.com

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0 中国病毒学EBNA1 一AS O :

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DNs ~ e - AS O :

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5 第l5卷 TGAG -

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4 0培养藏购自GI B CO公司.胎 牛血 清(fetalcalfsemm,F C S ) 购 自本 校微 生物教研室.

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H― T d R. 购于 中 国原 子 能研 究所,放射比强 度为0.6uCi / n mo l .