PDF《朱振 主》

1 2 方法1.2.1细胞 的 传代 及分组SUNE - 1细胞株按 常 规方 法 隔天 胰酶消化及 传代.于 细 胞对 数生长期常规收集细胞 . 计数后分 为A、 B、 C和D, 共 4组 . 每组 各 8瓶 细胞 (

1 0 %F C S组和无FCS组 各 4瓶 ) . 每瓶细胞数均为5*10. 、

1 2 .

2 4种EBV- AS O 的 加入 A、 B 、 C和 D组 的细胞分 别加入EBNA I 、 D NA 酶、TK 和BHRF

1 一AS(3.每 组内4瓶 细胞 的各种AS (

3 终浓度均 分别为

0、

10、20和

4 0 mo l / L(

1 0 % F C S组和无FCS组相 同)1.23H- Td R 掺入 各瓶 内均 加入 H ― T d R

2 C i ;

继续 培养48h(实验 重复 4敬)1.24SUNE - I细胞株增殖 情况 的检测7各组细胞 经磷 酸盐 缓 冲藏 洗涤3遍 后.分别将 其中一半收集在纤维 滤 纸上 , 供 干岳 检测其epm数值 .

1 .

2 5 细胞凋亡 及其程度 的检 测 另一半 细胞按照本室方法..进行透射电镜 观察及DNA的抽 提、琼脂 培凝 胶 电泳 检测.2结果2.1SUN F ~1增殖情况不同浓 度、不同种类 的EBV― AS O对SUNE - 1细胞株增殖的影响结果见表l.从表1可 见 在实验 浓度 范 围内, E B V 的 4种 AS O 在有

1 O% F C S培养条件 下对 H- T d R的掺入影 响不大 ;

在无 F C S的培 养条件 下.BHR F1 . AS O能 显著抑制 H. Td R掺入 S U NE - 1细胞, 且浓 度越 高. 抑 制作 用越 明显 .各种 浓度的 其它 E B V ― AS O 则无显著 的抑制作 用. 衰1EBV4种 A S O对'

H-TdR的 掺人 S U N E - I 细胞 株 的弗 响Ta h l e

1 F删rkindsofEBV, AS Os a f f ~ t H- Td R i n e c qx r t a t i c ~ o f S U N E.

1 c e l l l i ne 组别Gr o u p s : 蒜导叠c:01020蚰Pl・

0 1

0 2

0 4

0 P 2・ N^l ・ 脚30D31±1

9 0

4 31

2 7 1±1

4 3

5 2 阳13±$

1 2

2 6

5 1 2±1

3 4

2 >

0 .

0 5

1 1

0 2 1±1

4 4

0 1

2 3

0 0±2

1 4

6 l

0 6

7 6±9 帅DN衅脚30860±9

8 2

3 0

8 7 7±3

5 0

5 2

7 0I 3±2

0 9

7 2

8 6

4 3±2

5 2I >

0

0 5

1 0

6 5 0±7

4 3

8 7

2 9±7

3 7

9 帅5±1

5 2 TK- As o

2 7

7 册±14钟拢7l±5

4 6

2 8

2 2 5±3

9 0

6 2

5 1

3 5±9

5 4 >

0 .

0 5

1 叮22±9

6 3

9 4

6 O±l

1 1

2 9

2 8 6±5

5 5 脚RF1・^∞

2 9

0 5 1±9

0 6

2 3

0 4 4±2

0 0

9 2

4 2

1 0±2

3 9

3 2

3 0

4 5±1

5 1

1 >

0 .

0 5

1 2

2 1 2±1

4 4

6 6

3 1 9±3

7 2

5 2

9 7±4

9 9

9 9 0±1 |

2 5 >

0 0

5 l

1 9

6 7±

6 5

6 >

0 0

5 9

8 5 3±5 3l >

0.

0 5

4 3 s B±3

2 4 <

0 01 *: P l 、 P 2值:分别指古

1 0 % F C S组和 不古FCS组 中. 4种EBV.AS O各散瘦组 分别与其不古 A S O 的正常对照组 比较 的结 果. 实验 重复 4攻. : PI 、 P 2: Ex i : e f imen t g r o up * i n e u b a t ~ wi t h d Hf e r ~ t o f f o u r k i n ds o f EBV- AS Os c o m p a r e wi t h ~ nt ml g r ou p s wi t h( PI )o r wi t h o u t ( P

2 )F CS r e s p e c t i v e l y Th e e x p e r i ~ n t r e p e a t s

4 t i me s

2 .

2 S UNE - I的电镜观察经不同浓度EBV- AS O 处理的SUNE . 1细胞株,仅BHRF

1 . A S O 组经无FCS培 养48h在 常规透 射 电镜下可 见较 多数 目不 等的凋亡 细胞 , 即出现细 胞核凝缩 、 线粒体 及 细胞 膜 等结构 尚完整,呈现细胞拥亡的 典型特征(图1);

而含10%FCS组 细胞形态基本保持正常,很少见到典型的凋亡细胞.维普资讯 http://www.cqvip.com 第 3期 朱振 字等:EB病 毒 4种反 义 寡核 苷酸片段 对 鼻咽 癌SUN E- I细胞株的 影响211图1SUNE .