编辑: 笔墨随风 | 2016-03-30 |
2 群体水平上不同标记之间等位基因的非随机性关联. 注:在遗传过程中,处于连锁不平衡状态基因座上的等位基因具有共同遗传的趋势,群体中的单倍型频率会高于或 者低于应用乘积定律计算出的频率. 3.5 连锁平衡 linkage equilibrium, LE 位于不同染色体上的基因座, 或者位于同一条染色体但相距较远的基因座常按照随机组合原则进行 遗传,呈不连锁遗传状态,这种基因座之间没有相关性的状态称之为连锁平衡. 注:各个遗传标记处于连锁平衡状态,表明各遗传标记相对独立,可采用乘积定律分析它们的累积概率. 3.6 似然率 likelihood, LR 评估遗传分析提供证据强度的指标,数值上是两个条件概率的比值.
4 基本要求 4.1 鉴定机构应具有从事法医物证的执业范围,且应满足如下要求: a) 定期参加能力验证相关计划并考核合格;
b) 对所有影响鉴定结果的人员岗位规定相应的能力要求,包括教育、资质、培训、专业知识、技 能等,并保留相关记录;
制定适宜的培训计划并组织实施;
c) 依据鉴定方法和要求对鉴定人以及参与鉴定工作的人员进行监督, 以评价其鉴定工作的符合性 和满意程度;
监督的结果应作为培训需求评价的依据之一;
d) 具有能识别样本的标识系统,并确保样本在鉴定过程期间能得到持续的识别;
e) 建立样本的运输、接收、处置、保护、存储、保留和/或清理的规定,应对接收、内部传递、 处置、保留、返还和清理等过程进行记录,确保记录的完整性和可追溯性. 4.2 鉴定人应具有法医物证鉴定执业资格, 熟悉并掌握 X-STR 检验的方法和原理, 并能正确评价结果. 4.3 鉴定活动应包括检验(采样、DNA 提取和纯化、DNA 定量分析、PCR 扩增与 PCR 产物分型)、 系统评估、似然率计算、鉴定意见判断、鉴定文书撰写等环节.鉴定活动完毕后,应将各个环节的记录 进行归档.
5 检验程序 5.1 采样要求 样本的采集、包装及保存应按照以下要点: a) 样本可以是血液(斑)或口腔拭子(唾液斑),也可以是其它人体生物学样本,如精液(斑)、 带毛囊毛发、羊水、组织块等;
b) 对于接受了外周血干细胞移植的被鉴定人, 应避免采集其血样作为检验样本, 宜取其口腔拭子 (唾液斑)或毛发进行检验;
c) 样本应分别包装,注明被鉴定人姓名、编号、采样日期等;
d) 样本采集后应冷藏或冷冻保存. SF/Z JD0105006――2018
3 5.2 DNA 提取和纯化 按照GA/T 383-2014中附录A的方法执行. 5.3 DNA 定量分析 按照GA/T 383-2014中6.1~6.3的方法执行. 5.4 PCR 扩增与 PCR 产物分型 5.4.1 X-STR 基因座 选用多态性X-STR基因座进行PCR扩增,基因座选择宜参照如下条件: a) 已有基因座定义和其特征的文献报道;
b) 已实施种属特异性、灵敏性、稳定性研究;
c) 已有可供使用并公开发表的群体遗传数据, 包括从有关人群中获得的基因座等位基因频率或单 倍型频率及突变率等;
d) 串联重复单位为
三、四或五核苷酸;
e) X-STR 基因座可选用 DXS
7132、DXS
7423、DXS
8378、DXS
10074、DXS
10079、DXS
10101、 DXS
10103、DXS
10134、DXS
10135、DXS
10146、DXS
10148、HPRTB 等.可增加文献报道且 经验证的其它 X-STR 基因座,以提高系统效能. 5.4.2 PCR 扩增 应选用商品化的试剂盒进行PCR扩增,每批扩增均应有阳性对照样本(已知浓度和基因型的对照品 DNA或以前检验过的、已知基因型的样本)以及不含人基因组DNA的阴性对照样本.PCR扩增体系与 PCR扩增参数宜按试剂盒的操作说明书进行. 5.4.3 PCR 产物分型与结果判读 使用遗传分析仪对PCR产物进行毛细管电泳.按照操作手册使用相关软件进行结果判读. 对X-STR基因座进行分型检测时,通常男性样本在单个基因座仅表现为1个等位基因峰,女性样本 在杂合子状态表现为2个等位基因峰, 纯合子状态表现为1个等位基因峰. 对于X染色体数目异常的个体, 如47, XXX的女性、47, XXY的男性和45, X/ 46, XX Turner综合征女性嵌合体等,进行X-STR基因座分型 时可能发现有等位基因个数异常的现象.