PDF《司法鉴定技术》

司法鉴定技术规范SF/Z JD0107015――2015 血液中

45 种有毒生物碱成分的 液相色谱-串联质谱检验方法 2015-11-20 发布 2015-11-20 实施 中华人民共和国司法部司法鉴定管理局发布SF/Z JD0107015――2015 目次前言.

I

1 范围.1

2 规范性引用文件.1

3 术语和定义.1

4 原理.1

5 试剂和仪器.1

6 测定步骤.2

7 结果评价.5

8 检出限和定量下限.5 附录 A.6 SF/Z JD0107015――2015 I 前言本技术规范按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草. 本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出. 本技术规范由司法部司法鉴定管理局归口. 本技术规范起草单位:司法部司法鉴定科学技术研究所. 本技术规范主要起草人:刘伟、沈敏、卓先义、沈保华、向平、卜俊、马栋、严慧. 本技术规范为首次发布. SF/Z JD0107015――2015

1 血液中

45 种有毒生物碱成分的液相色谱-串联质谱检验方法

1 范围 本技术规范规定了血液中45种有毒生物碱成分(见附录A)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检 验方法. 本技术规范适用于血液中45种有毒生物碱成分的定性定量分析. 也适用于尿液及体外样品、 可疑物 证中45种有毒生物碱的定性分析.

2 规范性引用文件 下列文件中对本技术规范的应用是必不可少的. 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于 本技术规范.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本技术规范. GA/T

122 毒物分析名词术语 GB/T

6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义 GA/T

122 中界定的术语和定义适用于本技术规范.

4 原理 本法利用

45 种有毒生物碱成分可在碱性条件下被有机溶剂从血液中提取出来的特点,以SKF525A 为内标,用液相色谱-串联质谱法的多反应监测(MRM)模式进行检测,经与平行操作的有毒生物碱对照 品比较,以保留时间、两对母离子/子离子对进行定性分析;

以定量离子对峰面积为依据,内标法或外 标法定量.

5 试剂和仪器 5.1 试剂 5.1.1 乙腈. 5.1.2 甲酸:优级纯. 5.1.3 甲醇. 5.1.4 乙醚:分析纯. 5.1.5 乙酸铵. 5.1.6 超纯水:由纯水系统制得,电阻率?18.2MΩ・cm. 5.1.7 pH9.2 硼砂缓冲液. 5.1.8 流动相缓冲液:20mmol/L 乙酸铵和 0.1%甲酸缓冲液:分别称取 1.54g 乙酸铵和 1.84g 甲酸置于 1000mL 容量瓶中,加水定容至刻度,pH 值约为 4. SF/Z JD0107015――2015

2 5.1.9

45 种有毒生物碱对照品标准溶液:分别精密称取

45 种有毒生物碱对照品各适量,用甲醇配成 1.0mg/mL 对照品标准储备溶液,置冰箱中冷冻保存,保存时间为

12 个月.试验中所用其它浓度的对照 品标准溶液均从上述储备液用甲醇稀释而得. 5.1.10 内标物 SKF525A 对照品标准溶液:精密称取 SKF525A 适量,用甲醇配制成 1.0mg/mL SKF525A 对 照品标准储备溶液,置冰箱中冷冻保存,保存时间为

12 个月.将储备液用甲醇稀释得 5?g/mL SKF525A 内标工作液,置冰箱中冷藏保存,保存时间为

6 个月. 注:本技术规范所用试剂除另有说明外均为色谱纯,试验用水为一级水(见GB/T 6682规定). 5.2 仪器 5.2.1 液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子源(ESI). 5.2.2 分析天平:感量 0.1mg. 5.2.3 涡旋混合器. 5.2.4 离心机. 5.2.5 精密移液器. 5.2.6 恒温水浴锅.

6 测定步骤 6.1 样品预处理 6.1.1 待测样品 取待测血液 1mL, 加5?g/mL SKF525A 内标工作液 10?L, 加1mL pH9.2 硼砂缓冲液后, 用乙醚 3mL 提取,涡旋混合,离心,将乙醚层转移至另一试管中,同法提取两次,合并乙醚液,置60°C 水浴中挥 干,残留物用 100?L 流动相(乙腈∶流动相缓冲液=70∶30)定容,供LC-MS/MS 分析. 6.1.2 空白样品 取空白血液