PDF《生物大分子纯化经验问答之三》

060308 用蒸馏水浸泡了

4 个小时,还未进行酸碱处理,但是体积只有 20ml 的样子,而文献上介绍的每克 DEAE-52 可 以溶胀到 6-8ml'

的柱床体积,不知道是什么原因?请chromatography 老师解答,在线等 待! 纤维素填料有两种,一种是预溶胀的,这样的填料 1g=2ml 是正常的,一种是干粉的,这样的填料 也许能达到 6ml 左右,用这方法纯化抗体有点古老,最好是选择亲和的方法,快且好. chromatography 老师: 预溶胀的和干粉的纤维素填料在外观上有什么区别吗?我打电话问试 剂公司的人,他们也不知道卖的是预溶胀的还是干粉的 预溶胀的也是干粉的. 问一个菜菜的问题: 我将发酵液离心 乙醇沉淀后, 复溶的沉淀活性还好 但是蛋白含量损失 严重,总蛋白量很少 .因为活性还好,希望我的目标蛋白还好吧!下一步我想跑阴离子柱, 但是我的蛋白含量很低,会有影响马??跑柱子对蛋白含量有什么要求? 如果你的目标蛋白含量不高,用沉淀的方法肯定收率会不高,我觉得还是直接上柱子好点,样 品浓度低也没关系,都可以,只是上的蛋白总量不能太少,否则难检测.离子交换,亲和,疏水柱本 身有富集的作用,所以浓度低没关系 我最近在用 sephacryl

200 装柱但是装上开始看不出来有裂纹.但当我用平衡液平衡后就出 来了裂纹. .而且是靠近柱子的进水口的位置. .我都是过夜平衡的.我用的平衡液是

50 mMtrisHCL 5mMEDTA 0.15M NaCL,装柱用的是蒸馏水.后听说用 0.15MNACL 装柱好我 改用 NACL. 但是还是不行.装柱子的流速是5ml/min 流一会后改成 2.6ml/min,是不是我 流速太大??但是我没有超过 sephacryl 200的压力限 制. .请问您是否用过这种填 料.用过的话能告诉我您装柱子的详细过程.参数和注意事项吗? 已经回复过,还是你的流速过快,这个填料刚性还是不如琼脂糖凝胶,所以压力大自然会导致 收缩.,建议别超过最大线流速,在使用时用到最大线流速的 50-70%就很保险 你好!我想纯化一个蛋白,想用离........