PDF《超高效液相色谱法检测啶虫脒在工厂化 双孢蘑菇栽培中的残留》

038、0.

38、1.9 和9.5 g,用于覆土中各小区 施药;

称取 0.

086、0.

86、4.3 和21.5 g,用于培养 料中各小区施药.均用

500 mL 水溶解,3 次重 复,备用. 1.2.1 培养料和覆土中啶虫脒的残留消解及迁移 试验 采用一次施药多次采样方法,参考 GB2763― 2014[6] 中规定的啶虫脒在蔬菜中的最大残留限量

1 mg/kg,结合当前菇农实际使用情况,设定覆土 和培养料中的啶虫脒有效成分用量分别为

1 (处理 1)、10 (处理 2)、50 (处理 3)和250 mg/kg (处理 4),另设不施药的空白对照 (CK). 覆土施药:称取

80 kg 覆土于搅拌机中,边搅 拌边喷雾加入啶虫脒,混匀;

将未加啶虫脒的培 养料

15 kg 装入试验筐,上面覆盖已施入不同浓度 啶虫脒的覆土 6.65 kg. 培养料施药:称取

180 kg 培养料于搅拌机 中,边搅拌边喷雾加入农药,混匀,取15 kg 装入 试验筐,上面覆盖不加啶虫脒的覆土 6.65 kg. 于施药后

2 h 以及

1、

3、

5、

7、

10、

15、

21、

28、

35、

42、49 d,按五点采样法,采集每小 区的覆土和培养料各

300 g,去除培养料样品中混 杂的覆土,于C20 ℃保存,备用. 1.2.2 双孢蘑菇子实体中啶虫脒残留变化试验 覆土和培养料的处理同 1.2.1 节.待每潮双孢蘑菇 子实体直径长至

5 cm 左右 (即

25、

37、48 d) 时采 收500 g,去除根部,用搅拌机打碎,于C20 ℃保存,备用. 1.3 分析方法 1.3.1 样品提取与净化 双孢蘑菇:准确称取

10 g 双孢蘑菇样品,置于

50 mL 塑料离心管中分别加 入3mL 水和

20 mL 乙腈,涡旋提取

2 min 后超声 提取

30 min;

依次加入

4 g 氯化钠和

2 g 无水硫酸 镁,充分振荡后,于4000 r/min 下离心

5 min;

取 上清液

10 mL 于试管中,用氮气吹干,加入

2 mL 乙腈超声提取

10 s,涡旋

10 s复溶;

移入装有

50 mg PSA 和50 mg Al2O3 的5mL 塑料离心管 中,涡旋

1 min,于10

000 r/min下离心

2 min;

取 上层溶液

1 mL 加入

1 mL 水稀释混匀,过0.22 μm 有机滤膜,待测. 覆土:称取

5 g 鲜土土样,置于

50 mL 离心 管中 (同时称取

10 g 覆土样品放入烘箱

100 ℃ 烘干,计算其含水量,以换算成同一水平).其他处 理同双孢菇子实体处理,高浓度的样品稀释到

5 mg/mL 以下,待测. 培养料:称取培养料样品

3 g,置于

50 mL 离 心管中分别加入

7 mL 水和

20 mL 乙腈 (同时称取

10 g 培养料样品放入烘箱

100 ℃ 烘干,计算其含 水量,以换算成同一水平).除添加的氯化钠增至

5 g 外,其他处理同双孢蘑菇样品处理,高浓度的 样品稀释到

5 mg/mL 以下,待测. 1.3.2 液相色谱检测条件 Waters Acquity UPLC BEH C18 色谱柱 (2.1 mm *

100 mm,1.7 μm);

等 度洗脱,流动相为 V (乙腈):V (水) =

20 : 80,流 速为 0.3 mL/min,检测波长为

246 nm,进样室温 度30 ℃,柱温

30 ℃;

进样体积

5 μL.在此条件 下,啶虫脒的保留时间为 4.5 min. 1.4 标准溶液的配制及标准曲线的绘制 准确称取啶虫脒标准品 0.01 g,用色谱纯甲醇 溶解并定容至

100 mL,得到

1 000 mg/L 的啶虫脒 标准溶液,用V(乙腈):V (水) =

50 :

50 溶液稀释 成质量浓度分别为 0.

02、0.

05、0.

1、0.

5、1 和5mg/L 的系列标准溶液,按照 1.3.2 节的条件测 定,以质量浓度为横坐标 (x),峰面积为纵坐标 (y),绘制标准曲线. 1.5 添加回收试验 在双孢蘑菇、培养料和覆土的空白样品中添 加啶虫脒,添加水平分别为双孢蘑菇:0.