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畜牧兽医学报

2008 39 (1): 123-128 ISSN: 0366-6964 CN: 11-1985/S 研究简报 扩展功能 本文信息 Supporting info PDF(675KB) [HTML全文](0KB) 参考文献 服务与反馈 把本文推荐给朋友 加入我的书架 加入引用管理器 引用本文 Email Alert 文章反馈 浏览反馈信息 相关信息 本刊中 包含"鸡I型干扰素;

生物 活性检测;

鸡Mx启动子;

萤光素酶" 的 相关文章 本文作者相关文章 ・ 陈伟业 ・ 葛金英 ・ 肇慧君 ・ 胡森 ・ 温志远 ・ 曹文雁 ・ 王喜军 ・ 黄克和 ・ 步志高 基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究 陈伟业,葛金英,肇慧君,胡森,温志远,曹文雁,王喜军,黄克和,步志高 1.

南京农业大学动物医学院,南京 210095;

2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验 室,哈尔滨

150001 收稿日期 修回日期 网络版发布日期 接受日期 摘要 为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子 (Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase, luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp- luc.以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启 动子的作用下获得转录表达;

荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理 细胞6 h后就可以检测;

对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍.该 检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳 动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值. 关键词 鸡I型干扰素;

生物活性检测;

鸡Mx启动子;

萤光素酶 分类号 DOI: 通讯作者: 作者个人主页: 陈伟业;

葛金英;

肇慧君;

胡森;

温志远;

曹文雁;

王喜军;

黄克和;

步志高