PDF《堕 蔡宜权 柯丽华》

1 I H S H 因此 , 标记的 多肽经 电泳后 . 仍带青荧光 索.故可 见荧光 .由于荧 光标记的多肽仍具 有一定的 生物学性质 . 因此 , 将此法标记的 多肽在紫 外灯下 回收 , 可作 免疫学研 究,也可 用于病 毒 多献的大 量 制备 .我们『 日 此法回收了病 毒的 l

1 个结构多肽 , 经 免疫学实验 证 明这些 多肽都具有抗原 活性 . 并 逐个测定了各 个多脞的 中和抗 原能力,结果 另文 报道 .

3 荧光标记 的多肽检测灵敏度 将标准蛋 白牛血清 白蛋 白( B S A) 定量后 进行标记 . 再经SDS―PAG E分析( 凝胶厚度0 .

8 mm) ,

9 0瓦紫外灯下观 察荧光带 , 最小可 见到

5 0

0 n g的蛋 白带 . 比考 马斯亮 兰染色灵敏度稍 差,如同3所 示. 这 可能 由于 异硫氰酸荧光 素的吸收光谱是

4 9

5 n m. i 酊我们用的 紫 外灯 为d5瓦275nm和

4 5瓦360nm各一 个,使荧光强度 够.该方法具有如下优点 : 试 剂简单 , 省时 问,电泳结束后即可 见 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 2期 王炜 等:草鱼出血病 病毒 多肽的黄光 染色

5 9 结果 , 可 回收蛋 白质 , 蛋 白质具有抗原活性.在条件一般 的实验室也能 宋用. 翻3标啦蛋 白的荧光 图谱与考 马斯亮 兰 色圈 藩比较 A: 荧光圈谱 B ;

考马斯亮兰染色图谱 F i $ .3 Co ml ~mt i v e SU I S - FAGE P a t t e r n s t h e F 】 u c r e

0 ∞ n ∞ L a b d a n d C∞ | 懈Rrill/amBl u e S ~ a i n A : F l u or c a c e n c ~ l a b e l B: Co o ma m~ b r i l l i a n t H瑚a4alnI;

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0 .1 v g 晦^参考文献1巾同科学院武汉病毒研究所. 叶1同水产科学院长江水产研电所沙市舒所草鱼 血病研究协作组 . 节( ( 【 H { 血病病 呼 肠孤病毒( F R V ) 棱酸特性的研究 技水渔业 ,

1 9

8 4 .

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2 许瞬主编 荧光和电疫荧光染色技术及应用. 第1.北市 : 人民卫牛 社.1983:80~8

2 3 王炜 . 陈延 . 钶丽华 , 等. 草鱼出血病病毒武设南} 胡 株的精细结掏与基目组 受多吐的研究 病毒学报 . I

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6 ( I :

4 4 - -4 g

4 许屏主编. 萤光和免疫荧光染色技术 及应用 第1畈北京 : ^匣卫七出版社 .

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6 9 Th e Fl u o r e s c e nc e St a i n i n g o f Gr a s s Ca r p He mo r r h a g e Vi r u s ( GC HV)P o l y p e p t i d e s W a ng W e i Ch e n Y a h Ca i Y i q ua n Ke Li hu a ( w № o f V / r N o ~ t , A c a ~ n / a

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7 1 ) I t h a d b e e n r e p o r t e d t h a t t h e GCHV( Gr ~s C a r p He mo r r h a g e Vi r u s ) i s a n e w me mb e r i n R e o v i r i - d a e a n d h a s

1 1 p o l y pe D t i d e s by o L l r L a b o r a t o r y-W e d i d f ur t h e r e x p e r i me n t s o l a t h e vi r a l p ol yp e p t i d e s . Th e v i r i o r ~ s ( GCHV一875)we r e p u r i f i e d f r o m t h e me d i u m o f i n f e c t i o n c u l t u r e c e l l s b y d e n s i t y g r a . d i e n t c en t r i f u g a t i o n t d i s s o l v e d i n t h e b u f f e r c o n t a i n i n g T r i s ― HC I

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