PDF《中国病毒学》

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4 第10卷第4期I995年I2月中国病毒学Vm OLO G I CA 龇NICA G

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0 N O.4 D e C.

19 95 黑龙江 省及长春市烟草病毒病的种类鉴定 』 文清5 ,

7 2 _ , ・ _ - ― _ _ _ ― _ 一r/1/(东北 农业 大学 . 哈 尔滨

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0 0

3 0

1 提要l991一l993年在黑龙 江 省主要 烟 区的 I

1 个县 及长春 市 采样 , 得l29个毒 株.经鉴剐寄 主溯 定,抗血清反应(板式酶联法或斑点酶联法)及电镜或免疫电镜观察,有TMV (

4 3 .

4 ) , P Vy (

1 7 ・

8 ) , CMV(

3 .

9 ) , TR V(

0 .

8 , Ts w、 r 等病毒,TMV 与PVY 混合侵染的古 l

0 .

1 , P VY 与 其它 病毒 混合 侵染 的占

1 1 .

6 , 另有

5 十标 样 为马斡 暮 Y病 毒组 成员,l0个为未 知. 关键 词烟草病 毒病 , 种类鉴定 黑龙江 省烟草栽培面 积约 l O

0 万亩 . 由于地 处寒带 , 栽培 方式和 农业 生态条件与 南方 有很 大 的差别 , 因而病毒病 种类和 发生情况也不相 同. 黑龙江省烟 草病 毒病 发生十分普 遍,发病率 一般为lo-2

0 , 严重 地块 达到l O

0 . 烟草病毒病类型复杂 , 除花 叶外 尚有 叶脉 坏死 、 萎、黄邑花 叶、畸形 等.近十年来 我 国各 省相 继报 道的烟草病 毒病 有15种1--12],国外报道 的有2

1 种D

3 ] 陈瑞泰 等(1986]在黑龙江 省发现烟草 花叶病毒 、 黄瓜花 叶病 毒、 马铃薯 Y 病毒 及Ittl 叶病 ( B S TV) 为 了较全 面地了解黑 龙江省的烟草病毒病 种类 及其 为害 , 我 们于l

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3 年对 黑龙 江省的 I J , r 县、 市的8

3 块烟 田及

5 十试验站的病毒病为害情 况进行了调查 , 并采样鉴 定其病毒 种类 . 此外 还 在长春市吉林 农大 试验站采样8 十,一并 进行鉴定 材 料与 方法 l 标 样采 集I91l殷1993年自6 月 初至

8 月末 先后 在 牡丹 江、 宁安 、 宾县 、 兰西、尚志 、 延寿、阿城 、 五常、青冈、绥化、 哈尔滨股长春 市 的烟 草 生产 田 及试 验站 调查 病毒 发生 情况 , 并 采样 l

4 9 个.回校后 用 汁液库 擦接种普通 烟(Nc

8 9 ) 抽苗及少数常 用鉴别 寄主( 心 叶烟 、 苋色 藜、蔓陀罗 、 千 日红等 ) 与此 同 时将样 _ 牢汁 液包 被酶 联板 , 并用攫 渍法包被 电镜 用铜网.2鉴别 寄 主反 应 裉据 各毒 株 在少 数鐾剐寄 主上 的症 状,并参照 抗血 清及电镜 观 察结 果,初步 归类 . 每 类取 少数 代表毒株 , 扩大寄士范日重复测定 . T MV毒株经心叶烟单斑分离纯化, C MV 及pVy毒株用无毒蚜接种分离 , 然后进行 其它试验 .

3 血 清学 反应用板 式酶联 法 或斑 点酶联法 测定 , 少数 用琼 脂双 扩散 法溴I 定.酶联法均 用市售 辣 根过 氧 化物 酶 标记 羊抗免BG( 北 哀生 物制 品所 或 军事 医学 科 学院 微生 物 流行病 研 究所 制)间接 法.板式酶联 法 底物 为邻 苯 二胺 , 斑车文千1994年2 月2 日收到 .

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9 .

5 年5 月1

9 日恪 回 维普资讯 http://www.cqvip.com 第4 期 魏培文等 : 黑龙江省爰

3 4 l 点酶联法底 物为 D A B(

3 ,

3 , 一 二氨基苯胺 ) . T MV, P VY及CMV抗血清为本室制备. 各毒株均用三种抗血 清测定.电镜观 察用浸渍 法包 被铜 阿,2磷钨 酸(PTA) 负染 , 凡有 可能是 C MV 的样 品,则用2 醋 酸铀 负染 , 或用A一 蛋白免疫电 镜观 察.不易直接 观察 到粒 体 的标样 , 其 汁液 经粗提 纯 后再观 察.结果】鉴别寄主反 应 各类 标样 在鉴别寄 主 上的反 应列于 表1.根据测 定结果 可将 棕样 分为