PDF《饮品中着色剂》

3 实验方法 3.1 试剂及相关溶液配制 0.02mol/L 乙酸铵溶液: 称取 1.54g 乙酸铵样品于 1000mL 水中充分溶解后, 然后 0.45?m 滤膜过滤后备用. 混标储备液:准确称取柠檬黄、胭脂红、日落黄标准品各 10mg,至50mL 容量瓶中, 用水溶解后定容即得 200? g/mL 的混标溶液. 标准混合工作液:移取不同体积的混标溶液,用流动相稀释,得到的浓度分别为 100? g/mL、50?g/mL、40?g/mL、20?g/mL、10?g/mL、5? g/mL、1?g/mL.

4 3.2 样品前处理 SPE 小柱的活化:使用前分别用 5mL 甲醇、5mL 去离子水活化. 上样和洗脱:准确称取饮品 2g,加入 SPE 小柱,弃去流出液,然后用 2mL 水和 2mL 甲醇-甲酸(7:3,V/V)溶液淋洗,最后用 5mL 5%的氨化甲醇进行洗脱,收集洗脱液. 蒸干溶解:洗脱液在 65℃下,氮气吹干后,用2mL 流动相溶解,混匀后,经0.45μm 滤膜过滤后进样. 3.3 色谱条件 流动相:A:甲醇;

B:0.02mol/L乙酸铵溶液 表4梯度条件 时间 A(%) B(%) 流速 0.00

20 80 1.00 5.00

35 65 1.00 12.00

90 10 1.00 17.00

90 10 1.00 17.01

20 80 1.00 25.00

20 80 1.00 色谱柱:SinoChrom ODS-BP 5?m 4.6* 250mm 流速:1.0mL/min 检测波长:254nm 进样体积:10μL 柱温:30℃

4 实验结果 4.1 典型分析谱图 图2 空白,样品,样品加标叠加谱图

5 4.2 线性相关性 分别移取不同体积的标准储备液, 配制浓度分别为1? g/mL、 5?g/mL、 10?g/mL、 20?g/mL、 40?g/mL、50? g/mL、100? g/mL的标准混合工作液.按浓度由低至高进样分析,以标准溶液 浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制校准曲线,柠檬黄、胭脂红和日落黄的线性相关性结 果如下. 表5 柠檬黄、胭脂红、日落黄浓度峰面积参数 编号 浓度(? g/mL) 峰面积(mAU・ sec) 柠檬黄 胭脂红 日落黄

1 1.0 24.338 20.487 19.573

2 5.0 124.229 106.250 101.745

3 10.0 249.831 213.970 204.813

4 20.0 496.277 424.599 406.880

5 40.0 997.899 853.083 813.641

6 50.0 1241.128 1061.206 1013.757

7 100.0 2508.491 2142.918 2037.176 图3 着色剂浓度-峰面积线性曲 表6 各目标物的线性方程 目标物 线性方程 相关系数 柠檬黄 y=25.0672x-3.2863 r=1.0000 胭脂红 y=21.4151x-2.4719 r=1.0000 日落黄 y=20.3602x-0.5465 r=1.0000 y = 25.0672 x - 3.2863 R? = 1.0000 y = 21.4151 x - 2.4719 R? = 1.0000 y = 20.3602 x - 0.5465 R? = 1.0000

0 500

1000 1500

2000 2500

3000 0

50 100

150 峰面积 mAU 浓度ug/ml 柠檬黄 胭脂红 日落黄

6 4.3 最小检出限 本系统的基线噪声为25?V, 根据3倍信噪比, 仪器的最小检出限分别为柠檬黄20ng/mL, 胭脂红25ng/mL,日落黄18ng/mL.根据前处理方法计算,各目标物的方法检出限分别为柠 檬黄20?g/kg,胭脂红25?g/kg,日落黄18?g/kg,参见表7. 表7 各目标物的检出限 检出限 柠檬黄 胭脂红 日落黄 仪器检出限(ng/mL) 20.0 25.0 18.0 方法检出限(mg/kg) 0.02 0.025 0.018 4.4 实际样品分析 按照上述方法分析中国检验检疫科学研究院测试评价中心提供的饮品(样品编号 16-U343) ,测试含量结果见表8. 表8 编号为16-U343饮品中含量测试结果 样品 含量(mg/kg) 柠檬黄 胭脂红 日落黄 样品1 20.8 0.228 40.2 样品2 20.7 0.232 42.0 平均含量 20.7 0.230 41.1 4.5 加标回收率 样品中加入浓度为50?g/mL的混标溶液1mL,经过处理后分析,得到的各样品的加标回 收率见表9. 表9 各样品的加标回收率表 样品 回收率(%) 柠檬黄 胭脂红 日落黄 加标回收率 100.1 87.4 87.9

7 5 结论 采用大连依利特公司 iChrom