PDF《人尿微量白蛋白（MAU;ALB）酶联免疫分析（ELISA）》

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2881505696 监督

电话:13818158258 人尿微量白蛋白(MAU;

ALB)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织 等样本中尿微量白蛋白(MAU;

ALB)的含量.

实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人尿微量白蛋白(MAU;

ALB)水平.用纯化的人 尿微量白蛋白(MAU;

ALB)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入 人尿微量白蛋白(MAU;

ALB) ,再与 HRP 标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合 物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色.TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下 转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的人尿微量白蛋白(MAU;

ALB)呈正相关.用酶标 仪在 450nm 波长下测定吸光度 (OD 值) , 通过标准曲线计算样品中人尿微量白蛋白 (MAU;

ALB) 含量. 试剂盒组成: 试剂盒组成

48 孔配置

96 孔配置 保存 说明书

1 份1份封板膜

2 片2片密封袋

1 个1个酶标包被板 1*48 1*96 2-8℃保存 标准品 0.3ml*6 管0.3ml*6 管2-8℃保存 酶标试剂

5 ml*1 瓶10 ml*1 瓶2-8℃保存 样品稀释液

3 ml*1 瓶6ml*1 瓶2-8℃保存 显色剂 A 液3ml*1 瓶6ml*1 瓶2-8℃保存 显色剂 B 液3ml*1 瓶6ml*1 瓶2-8℃保存 终止液

3 ml*1 瓶6ml*1 瓶2-8℃保存 20*浓缩洗涤液 15ml*1 瓶25ml*1 瓶2-8℃保存 注:标准品浓度依次为:

40、

20、

10、

5、2.

5、0 μg/mL. 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心

20 分钟左右(2000-3000 转/分) .仔细收集 上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心. 2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心

20 分钟左右(2000-3000 转/分) .仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次 离心. 3. 尿液:用无菌管收集,离心

20 分钟左右(2000-3000 转/分) .仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心.胸腹水、脑脊液参照实行. 订购热线:4008898798 021-61725725 QQ:2881505690

2881505696 监督

电话:13818158258 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集.离心

20 分钟左右(2000-3000 转 /分) .仔细收集上清.检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞 浓度达到

100 万/ml 左右.通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份.离心

20 分 钟左右(2000-3000 转/分) .仔细收集上清.保存过程中如有沉淀形成,应再次离心. 5. 组织标本:切割标本后,称取重量.加入一定量的 PBS,PH7.4.用液氮迅速冷冻保存备 用.标本融化后仍然保持 2-8℃的温度.加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或匀浆器将 标本匀浆充分.离心

20 分钟左右(2000-3000 转/分) .仔细收集上清.分装后一份待检 测,其余冷冻备用. 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验.若不能马上 进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含 NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性. 操作步骤 1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;

. 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、待测样 品孔.在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl (样品最终稀释度为