PDF《,朱彩珠 2 ,葛艳1》

第l8卷 2期2003年4月中国病毒学VI R0L0GI CA S I NI GA

1 8 ( 2) : l

5 5 一l58Ap r il

2 0

0 3 口蹄疫病毒非结构蛋 白3abc基因的克隆与表达 尤永进 - ,朱彩珠

2 ,葛艳1,陈 波 ,张 强2,饶 忠,7自/~-/x1,卢永干

2 (

1 .

上海 市 农业 科学 院畜 牧兽 医研 究所 ,上 海市 农 业遗 传育种 重 点实 验室 动物 遗传 工程 研 究分室 ,上海,2

0 1

1 0

6 ;

2 .中 国农 业科 学院 兰州 兽医 研究 所 ,甘肃 兰州,7

3 0

0 4

6 ) Cl o n i n g a n d Ex p r e s s i n g FM DV No n - S t r u c t u r a l Pr o t e i n

3 a b c Ge n e i n E. c o f i Y OU Y o n g - j i n , Z HU C a i . z h u , GE Y a n , C H EN B o , Z HA NG Qi a n g , R AO Z h o n g , XU Qu a n - x i n g , L U Y o n g - g a n '

r J . A n i m a l Ge n e t i c E n g i n e e r i n g R e s e a r c h S e c t i o n , S h a n g h a i Mu n i c i p a l K e y L a b o r a t o r y o f A g r i c u l t u r a l G e n e t i c a n d B r e e d i n g , I n s t i t u t e o f A n i m a l Hu s b a n dr y a n d V e t e r i n a r y Me d i c i n e , S h an g h ai A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s , S h an g h ai

2 0

1 1

0 6 , C h i n a ;

2 . L a n z h o u V e t e r i n a r y R e s e a r c h I n s t i t u t e , C h i n a A c a de m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s , L a n z h o u

7 3

0 0

4 6 , C h i n a) Ab s t r a c t :Th e Fo o t . a n d . mo u t h d i s e a s e v i r u s( F M DV、n o n . s t r u c t u r a l p r o t e i n

3 ABC c a n b e u s e d f o r d i f fe r e n t i a t i o n o f i nf e c t i on f r o m v a c c i na t i o n. Th e p r i me r s o f

3 ABC g e n e we r e de s i g n e d a n d s yn t he s i z e d , a n d t he 5'

e n d a n d 3'

e nd o f p r i me r s we r e a d di n g t he s e q u e n c e of r e s t r i c t i on e n d o n uc l e a s e Ba mH I a n d Hi nd I I I r e s p e c t i v e l y .Th e

3 ABC g e n e c od i n g r e g i on wa s ob t a i n e d f rom t h e FM DV g e n o m e RNA b y RT. PCR.T h e a mp l i f ie d f r a g m e nt wa s c l o n e d i n t o T. v e c t or .The r e c omb i n a n t p l a s mi d p T.

3 ABC wa s di ge s t e d wi t h Ba mH I a n d , l d I I I a n d t h e n c l on e d i n t o p ET3

2 a .T h e r e c omb i n a n t pl a s mi d p ET3 ABC wa s t r a n s f o r me d i n t o BL2 1( DE3 )p l y s S a nd t he t a r g e t p r o t e i n wa s i n d u c e d b y I P1 ℃ . Ex p r e s s i o n o f NSP.

3 ABC p r o t e i n wa s e x a mi n e d a n d i d e n t i f ic a t e d b V SDS. PAGE,W _ e s t e m bl o t t i n g a n d EU SA. T h e r e s u l t s s h o we d t ha t r e c omb i n a n t p l a s mi d p ET3 ABC wa s c on s t r u c t e d a n d t he NS P.

3 ABC wa s e x pr e s s e d i n Ec o l i s u c c e s s f u l l v .A s p e c i a l e l e c t r o p h o r e t i c b a n d i n S DS . P AGE (

5 6 k Da )Wa s n o t e d ,We s t e m b l o t ti n g s h owe d i t C a n r e a c t wi t I l FM DV i n f e c t e d a n i ma l s e r u m , a n d ELI SA r e s u l t s ho we d t he e x pr e s s e d p r o t e i n C a n b e u s e d t o d i f fe r e nt i a t e t he i n f e c t i o n f ro m v a c c i n a t i on . Ke y wor ds : Fo o t - an d- mou t h d i s e a s e v i r u s ;

Non - s t I

1 l c mr a l pr o t e i n;

Cl o n i n g;

Exp r e s s i o n 摘要 : 口蹄疫病毒 ( F o o t . a n d. m o u t h d i s e a s e v i r u s, F MD v)非结构蛋 白(NSP).

3 A B C可用于注苗与感 染动物 的 鉴别诊 断, 合成该基 因的 P C R引物, 并在 引物

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端和

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