PDF《朱湘民 郑大》

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9 8 毛细管气相色谱 分析 昆虫病毒包涵体 中的脂肪酸 朱湘民 郑大 ∥ 汤显春 夏 弹明 柬冬 林 关键词!兰兰鱼堡生―一.

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(中国科学院武t 病毒研究所. 武汉43(~7 颗粒体病毒,脂肪酸,毛纳管气相色谱乞;

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病毒脂肪酸的定性和定量 , 可作 为病毒分类 鉴定的辅助证据 有关细胞脂肪 酸的研究 已 有报 道,但对病 毒多角体 ( p o l y h e d r o n s ) 和颗 粒体( g r a n u l e s ) 中脂 肪酸成份的研 究 尚未 见报 道.本研究在病 毒单糖分析的基础上『 、 用毛细管气相色谱 法, 对 8株 NP V和 8株 G V中的 脂肪酸种类和相对量进行了分析 , 并用相应脂肪酸色谱峰的峰高 比值来区分毒 株间的异同, 对病毒脂 肪 酸在 鉴 别毒 株中的作 用进 行 了探 讨.材料 与方法 l 供试毒 株萘粉蝶颗粒 悻病 毒中 n 『 株PrGV―Z 、 成都株 P r G V一( 、 、 E 海株PrGV―S 、 武汉 株PrGV―W、 榆墩棣 P r G \ 一Y;

白杨天 社蛾颗粒体病毒 湖北株 Ma GV―H;

黄地老虎颗粒体痫毒 北京株 A s G V~B;

萤刺 蛾颗粒体病 毒 川株 x[ G V―S ;

家蚕 枝型多 糟体病毒浙江 株BmN P V―z;

柞 蚕核型多 角体病毒 南株Ap N P V―I { ;

荼毛虫核 型多角体病 毒福建 抹EpNPV―F 、 安 吱株 E p N P V―A;

_ 椰 饽虫 桉型 多 角体病 毒武扳株Ha NP V―W、 美 目株 Ha N P V―M、 山东株 Ha N P V―s ;

美目 自蛾枝 型多角悼病 毒陕西株 H c N P V―S . 以上毒 株均 由中国菌种 保藏委员 会普通微 生物 ( 病毒 ) 中心提供 .

2 病毒样 品的 制备 与提纯 按文献 [

4 ] 的方法提 纯病毒样 品、 用l5%S D S悬浮洗涤, 离心, 再用重 蒸水洗涤 , 离心后十燥 备用c

3 病毒脂肪 酸 甲酯的制 备与提纯 丹别称 取干燥的毒 株样 品10n增, 置20m】 瞎 口玻管 内, 加5%N a O H 甲醇 溶液

5 m[ . 、 加塞届 于水中水浴30m冷却后用 6mo t / 【 l H C I 调pH2,加15%B F 、 一甲醇溶被

4 ml , 加塞后于拂水 中水灌

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玲却 加饱 和NCl溶渡If)mI ;

冉用8ml 氯仿 一正 已烷 (

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4 ) 溶 液提取 两碾 , 合并提取 液,加无 水硫 酸钠

1 g , 静嚣 后吸出 匕 层溶{ i 蔓,用N2 畋干 . 接 着用重蒸 已烷溶 解至

0 1 mI , 供色谱分析 用 分别配 制1g/mI 的C~的各种直链饱币 Ⅱ 啮腑 酸 甲酯 . 油酸 甲酶 和哑 油放 甲酯的 正 已烷 溶液 作 为标准脂 肪酸 甲酯 试剂.

4 色谱 条件 脂 肪酸分析 在GC一9 A气于【『色酱仪 进行 .色谱 柱:高技弹性 石毛细管 ( C P ] 系列 ) OV一1 (

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2 4 mm*5 【 ) m, 程序升温 :

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1 7 一 增噼 、 / 维普资讯 http://www.cqvip.com 第2 期朱湘民 等: 毛细管气 相色谱分析昆虫病毒 包涵 体中的脂肪酸 ! : 结果与讨论 依据 各种脂 肪酸在上 述色 谱条 件下的保 留 时间 , 并对照标样中各脂 肪 酸峰 与峰 的相 对距 离,可确 定各毒株 中 脂肪 酸组 成 成份 .表 1是