PDF《C12P 19/12 (2006.01)》

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1 和CCTCC? M94030. 图1 表示温度对由根瘤菌属的Rhizobium? SP.M-11 菌获得的非还 原性糖类生成酶的活性的影响. 图2 表示p H 值对由根瘤菌属的R h i z o b i u m ? S P . M -

1 1 菌获得的非还原性糖类生成酶的活性的影响. 图3 表示由Rhizibium? SP.M-11 菌获得的非还原性糖类生成酶的 热稳定性. 图4 表示由Rhizibium? SP.M-11 菌获得的非还原性糖类生成酶的 pH稳定性. 图5 表示温度对由节杆菌属的Arthrobacter? SP.Q36 菌获得的非 还原性糖类生成酶的活性的影响. 图6 表示p H 值对由A r t h r o b a c t e r ? S P . Q

3 6 菌获得的非还原性糖类生成酶的活性的影响. 图7 表示由Arthrobacter? SP.Q36 菌获得的非还原性糖类生成酶 的热稳定性. 图8 表示由Arthrobacter? SP.Q36 获得的非还原性糖类生成酶的 pH稳定性. 本发明涉及一种新的非还原性糖类生成酶,以及它的制备和应用. 本发明还涉及能够产生这种酶的微生物,用这种酶所制备的非还原性 糖类含有所说非原性糖类的相对低还原性糖类,由这些糖类制备的海 藻糖、以及含有这些糖类和海藻糖的之一和两者的组合物.本发明人广泛筛选了能够产生一种新的非还原性糖类生成酶的微 生物,当这种酶作用于还原性淀粉部分水解产物时能生成具有海藻糖 结构的非还原性糖类,最终发现了目标微生物. 现在,本发明人首先阐述该根瘤菌属微生物,即本发明的 Rhizobium? Sp.M-11 菌的鉴定试验.该试验是按照在 Bisebutsu-no-Bunvui-to-Dotei (微生物分类和鉴定)中所述方法进 行的.该书由Takej? Hasegawa 编辑,由日本科协出版社出版,日本, 200710180720.0 说明书第5/46页7东京1985).结果如下: A.形态学 当在27℃在营养琼脂中培育时细胞的特征: 一般呈0.6~0.8*1.0~1.5μm的杆状;

一般单独存在,但偶尔也以偶联或接合形式存在;

不表现出多形性;

具有游动性、不产孢子性和鞭毛;

不耐酸;

革兰氏染色:阴性;

胞襄:无;

异染粒:有;

能积累多-β-羟丁酸. B.培养特性 (1 ) 当在2

7 ℃在营养琼脂板中培养时所形成的菌落的特征形状: 在培养24小时之后圆形菌落的直径为1.5mm左右;

边缘:完整;

突出物:平均或半球形;

光泽:有;

表面:光滑;

颜色:乳白色半透明;

(

2 ) 在2

7 ℃ 温度下,在含有葡萄糖和胰蛋白胨的琼脂板上培养时所形成菌落的特征 乳白色半透明菌落具有类粘蛋白;

(

3 ) 在2

7 ℃ 温度下,在含有酵母抽提物和甘露醇的琼脂板上培养时所形成菌落的特点 形状:培养5天后,圆形菌落的直径为3mm左右;

颜色:乳白色半透明菌落具有类粘蛋白;

(

4 ) 在2

7 ℃ 温度下,在含有酵母抽提物、甘露醇和刚果红的琼脂板上培养时所形成菌落的特征 200710180720.0 说明书第6/46页8呈浅桃红色且基本上不吸收刚果红;

(5) 在27 ℃的温度下,在含有酵母抽提物、甘露醇和2w/v %NaCl 的琼脂板上生长;

(

6 ) 在2

7 ℃ 温度下,在营养琼脂斜面上培养时所形成菌落的特征生长:令人满意;

形状:丝状;

并且 (

7 ) 在27℃温度下在营养明胶上穿刺培养时不会液化明胶.C.生理特性 (1)硝酸还原作用:阳性 (2)反硝化作用:阴性 (3)甲基红测验:阴性 (4)VP-测验:阴性 (5)吲哚生成:阴性 (6)硫化氢生成:阳性 (7)淀粉水解:阴性 (8)柠檬酸的利用:阳性 (9)无机氮源的利用: 利用了铵盐和硝酸盐;