PDF《实验一 特殊显微镜的使用方法》

同时 削弱背景波的振幅,凸显干涉的效果. 细胞生物学实验 细胞生物学实验 相差显微镜的装置 相差显微镜的装置 细胞生物学实验 细胞生物学实验 环形光阑(annular diaphragm) 位于光源与聚光器之间,作用是使透过聚光器的 光线形成空心光锥,焦聚到标本上.. 细胞生物学实验 细胞生物学实验 相位板( 相位板(annular annular phaseplate phaseplate) ) 在物镜中加了涂有氟化 在物镜中加了涂有氟化 镁的相位板,可将直射 镁的相位板,可将直射 光或衍射光的相位推迟 光或衍射光的相位推迟 1/4 1/4λ λ 细胞生物学实验 细胞生物学实验 A+ A+相板 相板:将直射光推迟 :将直射光推迟1/4 1/4λ, λ,两组光波合轴后光波相加,振 两组光波合轴后光波相加,振 幅加大,标本结构比周围介质更加变亮,形成亮反差(或称负 幅加大,标本结构比周围介质更加变亮,形成亮反差(或称负 反差). 反差). B+ B+相板 相板:将衍射光推迟 :将衍射光推迟1/4 1/4λ, λ,两组光线合轴后光波相减,振 两组光线合轴后光波相减,振 幅变小,形成暗反差(或称正反差),结构比周围介质更加变 幅变小,形成暗反差(或称正反差),结构比周围介质更加变 暗. 暗. 细胞生物学实验 细胞生物学实验 相差显微镜可提高成像的对比度,可将样品所造成的细微光程 差转变成明显的光强度对比,清楚观察到在明视野下薄而透明 的样品,而且不会像暗视野显微镜一样降低分辨率.所以其最 大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞. a. a.明视野显微镜 明视野显微镜 b. b.相差显微镜 相差显微镜 人大脑神经胶质细胞 人大脑神经胶质细胞 细胞生物学实验 细胞生物学实验 使用方法 (1)相差装置的调换安装 (2)调焦 (3)合铀调整 细胞生物学实验 细胞生物学实验 荧光显微镜 荧光显微镜 ? ? 工作原理 工作原理 ? ? 基本装置及光路 基本装置及光路 ? ? 适用于荧光显微镜的样品 适用于荧光显微镜的样品 ? ? 使用方法 使用方法 细胞生物学实验 细胞生物学实验 Higher excited state Lower excited state Emission Ground State 细胞生物学实验 细胞生物学实验 落射式照明光路 基本设置 细胞生物学实验 细胞生物学实验 自发荧光的观察 自发荧光的观察 枫叶叶柄,红色:自发荧光;

绿色:外加荧光 细胞生物学实验 细胞生物学实验 外加荧光的观察 外加荧光的观察 荧光显微镜照片(微管呈绿色、微丝红色、核蓝色) 细胞生物学实验 细胞生物学实验 使用方法 1.打开灯源,超高压汞灯要预热几分钟才能达到最亮点. 2.透射式荧光显微镜需在灯源与聚光器之间装上所要求的激 发滤片,在物镜的后面装上相应的阻断滤片. 3.用低倍镜观察,根据不同型号荧光显微镜的调节装置,调 整光源中心,使其位于整个照明光斑的中央. 4.放置标本片,调焦后即可观察. 使用中应注意:末装滤光片不要用眼直接观察,以免引起眼 的损伤 细胞生物学实验 细胞生物学实验 作业 作业 1.为什么暗觉野显微镜的视觉场暗黑,样品影像明亮? 2.为什么说相差显微镜可以直接观察活细胞? 3.荧光显微镜的两种滤光片各起什么作用? ........